Студопедия

Главная страница Случайная страница

Разделы сайта

АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника






Количественное определение белка в моче колориметрическим методом с пирогаллоловым красным.






Принцип метода: при взаимодействии белка с пирогаллоловым красным и молибдатом натрия образуется окрашенный комплекс, интенсивность окраски, которого пропорциональна концентрации белка в пробе.

Реактивы: Рабочий реагент – раствор пирогаллолового красного в сукцинат-ном буфере, калибровочный раствор белка с концентрацией 0, 50 г/л

Ход работы:

Отмерить Моча Калибратор Вода дист.
Моча 20 мкл
Калибратор 20 мкл
Вода дист. 20 мкл
Рабочий реагент 1000 мкл 1000 мкл 1000 мкл

Пробы перемешать, выдержать 10 мин. при комнатной температуре (18 -25º С). Измерить оптическую плотность опытной (Dоп) и калибровочной пробы (Dк) против контрольной пробы при λ =598 (578-610) нм. Окраска стабильна в течении 1 ч.

Расчет: концентрацию белка в моче (С) г/л рассчитать по формуле:

С= Dоп/Dк× 0, 50

 

где: Dоп = Dк= C = г/л.

Нормальные величины: до 0, 094 г/л, (0, 141 г/сут)

Вывод:

 

 

Количественное определение глюкозы в моче

глюкозооксидазным методом.

Принцип метода: При окислении D-глюкозы кислородом воздуха под действием глюкозооксидазы образуется эквимолярное количество перекиси водорода. Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет хромогенные субстраты (смесь фенола и 4 аминоантипирина - 4ААП) с образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию глюкозы.

глюкозооксидаза

Глюкоза + О2 + Н2О глюконолактон + Н2О2

пероксидаза

2 Н2О2 + фенол + 4ААП окрашенное соединение + 4Н2О

Ход работы: в две пробирки вносят по 1 мл рабочего раствора и по 0, 5 мл фосфатного буфера. В первую пробирку добавляют 0, 02 мл мочи, во вторую – 0, 02 мл калибратора (калибровочный, стандартный раствор глюкозы, 10 ммоль/л). Пробы перемешивают, выдерживают 15 мин при температуре 370С в термостате и измеряют оптическую плотность опытной (Dоп) и калиб-ровочной (Dк) проб против рабочего реагента при длине волны 500-546 нм.

 

Расчет: С = Dоп/Dк · 10 ммоль/л Dоп= Dк =

С =

 

Содержание глюкозы в суточной моче ммоль/сутки определяют, умножая полученный результат на объем собранной за сутки мочи.

Вывод:

Примечание. При содержании сахара в моче более 1% ее необходимо разводить.

В настоящее время в биохимических лабораториях используется унифи-цированный экспресс-метод анализа мочи на глюкозу с помощью реактив-ной бумаги на глюкозу ² Глюкотест² или с использованием комбиниро-ванных тест-полосок на РН, белок, глюкозу, кетоновые тела и кровь. Тест-полоски, опускают в сосуд с мочой на 1сек. и сравнивают окраску по шкале.

Тестовый контроль по теме: ² Физико-химические свойства, нормальные и патологические компоненты мочи, качественный и количественный анализ патологических компонентов мочи².

Тест 1

Выберите правильный ответ

Глюкоза в крови в пределах нормы, в моче проба на глюкозу положительна. Это объясняется нарушением в почках процесса:

а) фильтрации

б) секреции

в) реабсорбции

г) концентрирования

д) разведения

Тест 2

Выберите правильный ответ

Повышение содержания аммонийных солей и снижение количества мочевины в моче происходит при заболевании:

а) печени б) сердца в) почки   г) мочевого пузыря д) тонкого кишечника

Тест 3

Выберите ВСЕ правильнЫе ответы

Кетонурия наблюдается при:

а) сахарном диабете

б) заболевании печени

в) углеводном голодании

г) несахарном диабете

д) заболевании почек

Тест 4

Выберитеь все правильные ответы

Кровь в форме красных кровяных клеток появляется в моче вследствие:

а) воспалительного процесса в нефроне

б) воспалительного процесса мочевых путей

в) травмы мочевыводящих путей

г) воспалительного процесса в селезенке

д) гемолиза эритроцитов

Тест 5

Выберите все правильные ответы

Появление прямого билирубина и уробилиногена в моче наблюдается:

а) гепатите

б) обтурационной желтухе

в) заболевании почек

г) гемолитической желтухе

д) заболевании селезенки

Тест 6

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Понижение плотности мочи наблюдается при:

а) полиурии

б) олигурии

в) протеинурии

г) снижении фильтрации

д) глюкозурии

Тест 7

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Полиурия наблюдается при:

а) диарее

б) сахарном диабете

в) заболевании печени

г) несахарном диабете

д) мочекаменной болезни

Тест 8

Выберите все правильные ответы

Патологические компоненты мочи:

а) β -оксимасляная кислота

б) ацетоуксусная кислота

в) мочевая кислота

г) гиппуровая кислота

д) порфирины

Тест 9

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Индикаторные ферменты, определяемые в моче для диагностики различных заболеваний:

а) АЛТ б) урокиназа в) трансамидиназа г) амилаза д) креатинкиназа

 

Тест 10

Выберите все правильные ответы

Бурый или коричневый цвет мочи вызывают компоненты:

а) кровь б) уробилиноген в) прямой билирубин г) гомогентизиновая кислота д) кетоновые тела  

Тест 11

Выберите все правильные ответы

Белок попадает в мочу вследствие:

а) повреждения нефрона

б) увеличения размеров пор почечного фильтра

в) поражения мочевых путей

г) повышения белков в питании

д) гипопротеинемии

Тест 12

Выберите ВСЕ правильные ответы

Креатинурия наблюдается при:

а) патологии печени

б) поражении мочевых путей

в) миопатии

г) в первые годы жизни ребенка

д) у стариков

Тест 13

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Повышение плотности мочи наблюдается при:

а) сахарном диабете

б) несахарном диабете

в) большой физической нагрузке

г) отеках

д) распаде тканевых белков

Тест 14

Выберите все правильные ответы

Нормальные компоненты мочи:

а) мочевина б) креатинин в) молочная кислота г) аминокислоты д) мочевая кислота  

 

Тест 15

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Патологические компоненты мочи при сахарном диабете:

а) глюкоза б) ацетон в) b - оксимасляная кислота г) ацетоуксусная кислота д) фенилпировиноградная кислота  

Тест 16

ВЫБЕРИТЕ ВСЕ ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ

Повышение аминокислот в моче:

а) заболевание печени

б) обширные травмы тканей

в) гипертиреоз

г) сахарный диабет

д) заболевание почек

Тест 17

Установите соответствие

«для каждого вопроса – несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз»

Содержание мочевины в моче: Заболевания:
1) повышается 2) уменьшается   а) сахарный диабет б) гипертиреоз в) голодание г) поражение печени д) поражение почек

 

Тест 18

Установите соответствие

«для каждого вопроса – несколько правильных ответов, каждый ответ может быть использован один раз или не использован совсем»

Содержание мочевой кислоты в моче: Состояния:
1) повышается 2) уменьшается   а) питание богатом белками (мясом, рыбой) б) белковое голодание в) подагра г) заболевание почек д) заболевание печени





© 2023 :: MyLektsii.ru :: Мои Лекции
Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав.
Копирование текстов разрешено только с указанием индексируемой ссылки на источник.