Темнопольная микроскопия.

Позволяет наблюдать живые бактерии. Метод тёмного поля основан на эффекте, кот-й достигается освещением объекта полым конусом света. Выявляются контуры объекта. При отсутствии объекта поле зрения микроскопа – тёмное, при наличии объекта – яркое блестящее свечение контура вокруг объекта на тёмном фоне. Метод предложен в 1903 г.

6. Основные отличия прокариотов от эукариотов.

Прокариоты:

· Нет мембран, кот-ми органеллы отделяются от цитоплазмы. Мембрана есть только цитоплазматическая, отделяющая цитоплазму от клет/оболочки или от внешней среды.

· Размер 1-10 мкм (у эукариотов 10-100 мкм).

· Анаэробное дыхание возможно. Фиксация азота возможна.

· Генетич материал наход-ся в кольцевой молекуле ДНК, у эукариотов – в хромосоме.

· Гистонов нет, у эукариотов – есть.

· Рибосомы не объединены в ЭПС.

· Ядро (нуклеоид) имеет фибриальную структуру и не имеет ядерной мембраны.

· Нет митохондрий, хлоропластов, комплекса Гольджи.

· Окислительно-восстановительные ферменты локализованы в мезосомах.

· Не делятся митозом, тип деления – бинарный.

· Нет клеточного центра.

· Нет внутриклеточного перемещения цитоплазмы и амёбовидного движения.

7. Основные типы культур бактерий.

Для изучения св-в микроорг-мов, их систематизации необходимо изолировать бактерии и вырастить их в виде «чистых культур» - массы клеток, состоящей из микроорг-мов 1 вида и полученных как потомство 1 клетки. Штамм – культура бактерий 1 вида, выделенная из разных источников в разное время. Вид – совокупность микроорг-мов, имеющих единое происхождение и генотип, сходных по морфологич и биологич св-вам. Колония – это «чистая культура», популяция микробных клеток 1вида, сформировавшаяся в рез-те деления 1 микробной клетки в условиях культивирования на плотной питат среде при оптимальной t. Различают 3 типа колоний: гладкие – S-тип (круглые, выпуклые, с гладкой поверхностью, влажной консистенцией), шероховатые – R-тип (шероховатые, края неправильные, консистенция сухая), слизистые – М-тип (тягучая консистенция).

8. Признаки идентификации микроорганизмов.

Фенотипич признаки – величина, форма, агрегация (образование нитей, тетрад, пакетов), наличие капсулы, эндоспор, жгутиков, пигментов и способность окрашиваться красителями. Все бактерии по отношению к окраске по Граму делятся на грам(+) – фиолетового цвета и грам(-) – красного. Способность окрашиваться зависит от хим/состава. У грам(+) в клет/стенке нет ароматических и серосодержащих аминок-т, мало липидов, у грам(-) – наоборот. У грам(+) есть магниевая соль РНК, у грам(-) – нет. Эта соль образует прочный хим комплекс с белком, йодом и генцианвиолетом, кот-й не разруш-ся спиртом. У грам(-) такого комплекса нет, они легко обесцвеч-ся под д-ем спирта.

Споры по Граму не окраш-ся, окраска появл-ся только после использования концентрированной подогретой краски. Причём при последующей обработке к-той спора не обесцвеч-ся. Кислотоустойчивые бактерии – для окраски применяют метод Циля-Нильсена. Морфология бактерий (культуры) изучается в окрашенных мазках либо в нативных препаратах.

Подвижность – скользящие (за счет волнообразных движений тела) и плавающие (за счет жгутиков или ресничек) бактерии.

Спорообразование.

Физиологич активность – по способу питания (по отношению к О₂ – анаэробные, аэробные и факультативные – получают энергию либо в процессе дыхания, либо при брожении).

Биохимич признаки культуры - по её способности ферментировать углеводы, образовывать индол, аммиак, сероводород, гидролизовать белки.

Антигенные св -ва – родоспецифичные, видоспецифичные, штаммоспецифичные.

Чувствительность к бактериофагам.

Химический состав.

Генетич родство – способность обмениваться генетич информацией, состав ДНК, сходство нуклеиновых к-т и их последовательности.

9. Определение методов микробиологической диагностики.