Приготовление микроскопических препаратов.

1. Препарат «раздавленная капля». На предметное стекло наносят каплю воды и помещают в нее небольшое колическтво культуры изучаемых мко, размешивают и накрывают покровным стеклом культуру, переносят в каплю воды бактериологической петлей, культуру, выращенную в жидкой среде, стерильной пипеткой. Капля исследуемого материала должна быть настолько мала, что бы после прижимания покровным стеклом не было избытка жидкости, выступающего из под него.

2. Препарат «висячая капля». Каплю суспензии мко петлей или обычным пером наносят на покровное стекло, которое поворачивают каплей вниз и помещают на специальное предметное стекло с углублением в центре. Края лунки предварительно смазывают вазелином.

3. Препарат «отпечаток». Из агаризованной среды вырезают скальпелем небольшой кубик и переносят его на предметное стекло, чтобы поверхность с мко была обращена вверх. Затем к газону чистое покровное стекло, слегка надавливают на него петлей или пинцетом и тот час же снимают, стараясь не сдвинуть в сторону. Полученный препарат помещают отпечатком вниз в каплю воды (1: 40) на предметное стекло.

4. Препараты фиксированных окрашенных клеток. 1) приготовление мазка. На обезжиренное предметное стекло помещают каплю воды и переносят в нее петлёй небольшое количество исследуемого материала. Получив суспензию равномерно размазывают петлей на площади 1-2 см . 2) высушивание мазка. Лучше всего сушить препарат при комнатной температуре на воздухе. Хорошо приготовленный мазок высыхает очень быстро. 3) фиксация: а- убить микроорганизмы, т.е. сделать безопасное дальнейшее обращение с ними; б – обеспечить лучшее прилипание клеток к стеклу; в – сделать мазок более восприимчивым к окраске, т.к. мертвые клетки окрашиваются лучше, чем живые. Термическая обработка 3 раза препарат проводят через горячее пламя горелки, держа предметное стекло мазком вверх. Фиксирующую жидкость наливают на мазок на определенное время погружает в стакан с фиксатором. 4) окраска. Различают кислые и основные. Кислые – анионные (хромофор). Основные – катионные. Кислые – кислый фуксин, эозин. Основные – метиленовый синий, основный фуксин. Различают простые и дифференциальные способы окрашивания. Простой способ – окрашивается вся клетка полностью, дифференциальный – окрашивается некая часть. Фиксированный препарат помещают на параллельные рейки, лежащие над кюветой и заливают красителем на 1-3 мин. В конце препарат промывают водой до тех пор, пока стекающая вода не станет бесцветной, затем его высушивают.