Микрофлора воздуха. Санитарно-микробиологические характеристики

(???) Контрольные вопросы по теме

1. Нормальная микрофлора воздуха внешней среды: резидентная, транзиторная.

2. Характеристика микрофлоры воздуха закрытых помещений, источники ее формирования

3. Воздух — путь передачи возбудителей воздушно-капельных инфекций.

4. Источники транзиторной микрофлоры воздуха помещений, в том числе воздуха производственных помещений аптек.

5. Санитарно-показательные микроорганизмы воздуха закрытых помещений — нормативы и их обоснование.

6. Определение степени микробной обсемененности воздуха закрытых помещений, производственных помещений аптек — общее микробное число (ОМЧ).

7. Нормативы ОМЧ для воздуха особо чистых помещений (асептические блоки, помещения фармацевтической промышленности для приготовления стерильных препаратов и др.).

8. Методы определения ОМЧ воздуха — седиментационный, аспирационный. Техника проведения, аппаратура. Достоинства и недостатки каждого метода.

9. Принципы санации воздушной среды асептического блока и других помещений аптек: химические, физические, механические.

10. Ультрафиолетовое облучение воздуха: аппаратура, механизм действия, режим облучения.

11. Мероприятия, проводимые для предупреждения попадания микроорганизмов от человека в воздух производственных помещений аптек: ассистентская, асептический блок и др.

12. Последствия возможной контаминации лекарственных форм микроорганизмами: сапрофитами, условно-патогенными, патогенными.

13. Методы выявления в воздухе производственных помещений аптек представителей энтеробактерий, синегнойной палочки, стафилококков и грибов — плесневых, дрожжеподобных.

(!!!) Задания для практической работы

1. Проведение посевов воздуха помещений кафедры микробиологии методом Коха (седиментационный метод) и с использованием аппарата Кротова (аспирационный метод).

2. Определение ОМЧ воздуха и наличие патогенной микрофлоры в помещениях аптек по ситуационным картам-заданиям:

а) торговый зал;

б) ассистентская;

в) асептическая комната;

г) дистилляционная;

д) стерилизационная;

е) моечная.

Определение ОМЧ, наличие и количество патогенной микрофлоры, сравнение с нормативами, анализ полученных результатов. Составление заключения и рекомендаций.

3. Работа с Приказом № 309 по санитарному режиму аптек. Разбор всех положений, касающихся воздуха аптечных помещений.

4. Оформление и защита протоколов по теме занятия.

Воздух не является подходящей средой для длительного пребывания микроорганизмов, особенно патогенных. Отсутствие влаги, питательных веществ, действие ультрафиолетовых лучей и т. д. ведут к гибели большинства микробов.

Нормальная микрофлора воздуха складывается из резидентной и транзиторной. Резидентная микрофлора — сапрофитные бактерии с липохромным пигментом (сарцины, микрококки, сапрофитный стафилококк и др.); бациллы (сенная палочка, микоидные бациллы и др.); плесневые и дрожжевые, дрожжеподобные грибы. Все эти микроорганизмы имеют структуры или механизмы, защищающие их от губительного действия ультрафиолетовых лучей, ^: отсутствия влаги, питательных веществ.

Транзиторная микрофлора — патогенные и условно-патогенные бактерии, вирусы. Они являются возбудителями воздушно-капельной инфекции, раневой инфекции, гнойно-воспалительных заболеваний и др. К ним относятся золотистый и эпидермальный стафилококк, дифтерийная, туберкулезная, синегнойная палочки, энтеробактерий (клебсиелла, протей, серрация и др.); вирусы кори, гриппа и др..

В неочищенном воздухе во взвешенном состоянии находятся инородные включения различных размеров:

0, 03-0, 30 мкм — вирусы, бактерии;

10, 0-100, 0 мкм — частицы пыли;

30, 0-200 мкм — волокна, волосы.

Бактерии находятся в воздухе в виде аэрозоля, который по размерам частиц делится на фазы:

— крупнокапельная, быстро оседающая фаза — капли диаметром более 100 мкм;

— мелкоядерная фаза — капли и частицы диаметром менее 10 мкм. Они длительно находятся во взвешенном состоянии и часть из них испаряется раньше, чем оседает («бактериальная пыль»)

Человек постоянно выделяет аэрозольные частицы, число которых колеблется от 1 тысячи до 30 миллионов в минуту, в зависимости от характера производимых им движений, состояния верхних дыхательных путей, интенсивности разговора. Капельки слюны, слизи при чихании, разговоре, кашле вместе с микробами попадают в воздух и с током воздуха могут разноситься далеко от источника. Бактерии могут оседать на пылевые частицы и «путешествовать» вместе с ними. Мелкодисперсные аэрозольные частицы практически не оседают и постоянно находятся во взвешенном состоянии. До 90% микробов, попадающих в воздух, погибают в течение 1 часа.

Воздух производственных помещений аптек — один из важных источников микробного обсеменения лекарственных препаратов. Одновременно воздух является каналом передачи микрофлоры из одного помещения в другое.

Поэтому для промышленного производства лекарственных препаратов разработаны регламентирующие документы по требованиям к микробной чистоте воздуха в помещениях для производства лекарственных форм в асептических условиях. Для помещений установлено 4 класса чистоы в зависимости от допустимого уровня загрязненности воздушной среды механическими частицами и микроорганизмами. Для помещений 1-2-го класса чистоты максимально допустимое число микробов колеблется от 0 до 50 в 1 м³ воздуха.

Степень микробной обсемененности воздуха помещений зависит от кубатуры, приходящейся на 1 человека.

Т а б л и ц а 1

Количество микробов в 1 м³ воздуха в зависимости от числа людей в помещении

Поэтому поддержание микробной чистоты воздуха является действенной мерой профилактики заноса микробов в лекарственные формы. Для контроля степени микробной обсемененности воздуха в аптеках и на предприятиях фармацевтической промышленности регулярно проводится определение следующих микробных показателей:

— общее микробное число воздуха (ОМЧ) — количество микроорганизмов в 1 м³ воздуха;

— наличие в воздухе золотистого стафилококка, грибов (плесневых, дрожжевых, дрожжеподобных), синегнойной палочки, энтеробактерий.

Методы изучения микрофлоры воздуха

Используются седиментационный и аспирационный методы.

Седиментационный метод Коха прост, не требует специальной аппаратуры. Суть метода: чашка с питательной средой ставится на рабочем столе, открывается на 10 мин, закрывается и ставится в термостат, где выдерживается двое суток при температуре 37 °С, а затем двое суток при комнатной температуре.. После этого проводится подсчет выросших колоний по формуле Омелянского.

Для выявления грибов в воздухе посев проводится на среду Сабуро и чашка выдерживается при t 22-25 °С до 5 суток. Для выявления патогенных бактерий посевы проводят на дифференциально-диагностические среды: для золотистого стафилококка — на желточно-солевой агар, для энтеробактерий — на среду Эндо с добавлением генцианвиолетта (для торможения роста сапрофитов), для псевдомонад — на среду № 9 (ГФ XI, т. 2). Чашки выдерживают в открытом виде 1 час, после чего ставят в термостат для культивирования при t 37 °С на двое суток с последующим выдерживанием при комнатной температуре в течение 2 суток.

Расчет по модифицированной формуле Омелянского ведется на 1 м² поверхности.

X = n^.10⁴ / p^.r^2.t (дробь)

где X — ОМЧ воздуха обследуемого помещения (КОЕ); п — количество колоний на чашке (КОЕ); t — время экспозиции чашки (мин); p^.r² — площадь чашки Петри (см²); 10⁴ — пересчет м² в см².

Формула Омелянского, даже модифицированная, имеет ряд существенных недостатков: а) нельзя определить точный объем воздуха, из которого микробы оседают на чашку; б) мелкодисперсная фаза аэрозоля (а с ним и микробы) практически не оседает и токами воздуха постоянно поддерживается во взвешенном состоянии.

Результаты, получаемые с помощью этого метода, позволяют сравнить, сопоставить степень микробной обсемененности разных помещений и ориентироваться при разработке мероприятий по очищению воздушной среды.

Существует другой метод расчета ОМЧ воздуха при использовании посева во методу Коха, без формулы Омелянского:

Нормативы оценки санитарного состояния воздуха аптечных помещений

Аспира ци онный метод изучения микрофлоры воздуха. В этом методе используется принцип ударной струи воздуха, получаемый с помощью аппарата Кротова. Достоинства этого метода:

— точно учитывается объем воздуха, пропускаемого через чашку с питательной средой, установленную в аппарате;

— принцип ударной струи способствует фиксации в питатель ной среде всех взвешенных частиц аэрозоля.

Таким образом, удается фиксировать на поверхности плотной питательной среды максимальное количество микроорганизмов, обитающих в воздухе. Используя различные виды элективных и дифференциально-диагностических питательных сред, можно выявлять в воздухе все основные группы патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.

Нормативы оценки санитарного состояния воздуха аптечных помещений при использовании аспирационного метода

Мероприятия, направленные на уменьшение микробной обсемененности воздуха производственных помещений аптеки

1. Оконные фрамуги или форточки, используемые для проветривания помещений, защищаются съемными металлическими или пластмассовыми сетками с размерами ячейки не более 2x2 мм.

2. Поверхности стен и потолков производственных помещений должны быть гладкими, без нарушения целостности покрытия, допускающими влажную уборку с применением дезсредств (1% раствор хлорамина Б, 0, 75% раствор хлорамина Б + 0, 5% моющего средства, 1% раствор гипохлорита натрия, 3% раствор перекиси водорода + 0, 5% моющего средства).

3. В производственных помещениях не допускается вешать занавески, расстилать ковры, разводить цветы. Информационные стенды и таблицы, необходимые для работы в производственных помещениях, должны изготовляться из материалов, допускающих влажную уборку и дезинфекцию.

4. Помещения асептического блока должны размещаться в изолированном отсеке и исключать перекрещивания «чистых» и «грязных» потоков посуды и вспомогательного материала. Асептический блок должен иметь отдельный вход или отделяться от других помещений производства шлюзами.

5. Перед входом в асептический блок должны лежать коврики из резины или пористого материала, смоченные дезинфицирующими средствами (0, 75% раствор хлорамина Б + 0, 5% моющего средства, 3% раствор перекиси водорода + 0, 5% моющего средства).

6. Для исключения поступления воздуха из коридоров и производственных помещений в асептический блок в последнем необходимо предусмотреть приточно-вытяжную вентиляцию, при которой движение воздушных потоков должно быть направлено из асептического блока в прилегающие к нему помещения, с преобладанием притока воздуха над вытяжкой.

7. Рекомендуется с помощью специального оборудования создание горизонтальных или вертикальных ламинарных потоков чистого воздуха во всем помещении или в отдельных локальных зонах для защиты наиболее ответственных участков или операций (чистые камеры). Чистые камеры или столы с ламинарным по током должны иметь рабочие поверхности и колпак из гладкого и прочного материала. Контроль стерильности воздуха проводится не реже 1 раза в месяц.

8. Для дезинфекции воздуха и различных поверхностей в асептических помещениях устанавливают экранированные и неэкранированные бактерицидные лампы (стационарные и передвижные облучатели) мощностью не менее 2, 0-2, 5 Вт на 1 м³ объема помещения.

9. Перед началом работы необходимо проводить влажную уборку помещений (полов и оборудования) с применением дезсредств. Сухая уборка помещений запрещается, т. к. с пылью поднимаются в воздух микроорганизмы. Например, в помещении до уборки ОМЧ = 1500 микробов в 1 м³; в этом же помещении во время сухой уборки ОМЧ = 4500 микробов в 1 м³.

10. Генеральная уборка производственных помещений и торговых залов должна проводиться не реже 1 раза в неделю. Моют стены, двери, оборудование, полы. Потолки очищают от пыли влажными тряпками не реже 1 раза в месяц. Оконные стекла, рамы и пространство между ними моют горячей водой с мылом или другими моющими средствами не реже 1 раза в месяц.

11. Оборудование производственных помещений и торговых залов подвергается ежедневной уборке, шкафы для хранения лекарственных средств в материальных комнатах убирают по мере необходимости, но не реже 1 раза в неделю.

12. Уборку помещений асептического блока (полов и оборудования) проводят не реже 1 раза в смену в конце работы с использованием дезинфицирующих средств (1% раствор хлорамина Б, 0, 75% раствор хлорамина Б + 0, 5% моющего средства, 1% ра створ гипохлорита натрия, 3% раствор перекиси водорода + 0, 5% моющего средства). Генеральную уборку проводят не реже 1 раза в месяц.

13. При заводском производстве лекарственных препаратов «чистые» помещения должны иметь многоступенчатую систему приточно-вытяжной вентиляции, которая создает кратность воздухообмена до 20 в час; причем непосредственно в помещения воздух должен поступать через фильтры тонкой очистки. Между помещениями различных классов чистоты должна поддерживаться постоянная разность давления в 3-5 мм водяного столба. При этом в помещениях более высоких классов чистоты давление должно быть выше.

Наиболее ответственные технологические операции должны быть защищены установками ламинарного потока стерильного воздуха.

Вход в помещения высокой степени чистоты должен осуществляться через воздушные шлюзы; через эти же шлюзы должна осуществляться и передача материалов.

Между помещениями различной степени чистоты должны быть электромеханические переговорные устройства.