Подготовка к анализу. Приготовление 10 %-ного раствора нитрия углекислого кислого

Приготовление 10 %-ного раствора нитрия углекислого кислого. 10 г натрия углекислого кислого растворить в 90 см³ дистиллированной воды.

Приготовление раствора казеина. К навеске казеина массой 0, 125 г, помещенной в коническую колбу или стакан вместимостью 100 см³ добавить 0, 75 см³ 1 %-ного раствора натрия углекислого кислого и 10…15 см³ дистиллированной воды. Смесь нагреть на водяной бане до температуры (85 ± 5) ⁰С, выдержать при данной температуре и периодическом перемешивании до полного растворения казеина. Полученный раствор охладить и количественно перенести в мерную колбу вместимостью 250 см³, объем довести до метки дистиллированной водой. Раствор перемешать.

Приготовление уксусно-алкогольного (спиртового) раствора. В коническую колбу с притертой пробкой (со шлифом) вместимостью 100 см³, внести 50 см³ этилового спирта, 50 см³ дистиллированной воды и 0, 25 см³ кислоты уксусной ледяной. Смесь перемешать.

Приготовление раствора вытяжки поджелудочной железы. Берут пробу поджелудочной железы, ножницами вырезают из нее часть, приблизительно, 1 х 1 см, режут на мелкие части, растирают в стерильной ступке, добавляют 50 см³ дистиллированной воды и перемешивают. Содержимое ступки переносят в колбу вместимостью 100 см³ и перемешивают в течение 30 минут на магнитной мешалке, отстаивают 30 минут. Содержимое колбы пипеткой осторожно (без комков и жира) переносят в мерную колбу (при необходимости фильтруют) вместимостью 100 см³. Раствор в колбе доводят до метки дистиллированной водой.

На анализ в стакан вместимостью 100 см³ взвесить 1…2 г измельченной поджелудочной железы (фарша), добавить 5…10 см³ дистиллированной воды, при помощи стеклянной палочки растереть пробу железы. Стакан поместить или на водяную баню или в термостат, смесь нагреть до температуры (38 ± 1) ⁰С, выдержать при этой температуре 30 минут, охладить и количественно перенести в мерную колбу вместимостью 500 см³, перемешать. Полученный раствор профильтровать через бумажный фильтр, помещенный на воронку. Фильтрат использовать в анализе.

Раствор вытяжки поджелудочной железы готовить перед анализом.

ВЫПОЛНЕНИЕ АНАЛИЗА

В ряд пробирок (10 штук) предварительно пронумерованных, налить дистиллированную воду, раствор вытяжки поджелудочной железы и раствор казеина в количествах согласно схеме, представленной в таблице:

Содержимое пробирок перемешать встряхиванием, поместить в регулируемую водяную баню при температуре (37±0, 1) ⁰С на 30 минут. После прогрева пробирки охладить под струей холодной воды. В каждую пробирку добавить 0, 5 см³ уксусно-спиртового раствора. Содержимое пробирок перемешать. Визуально оценить прозрачность полученных растворов в пробирках. Отметить номер первой в ряду пробирки с прозрачным раствором.