Микробиологический метод получения

Разработка промышленной технологии получения декстранов способом ферментации для дальнейшего использования в медицинских целях относится к 50–м годам XX века.

Отличительная особенность способа заключается в том, что к среде, содержащей первичный декстран, добавляется живая культура активного штамма Zenconostoc mesentегоides, выращенная на питательной среде, содержащей необходимые для развития культуры органические кислоты и низшие спирты и не содержащей инициаторов синтеза декстрана (особенно сахаров мальтозного и изомальтозного ряда).

Способ позволяет, перепрививая указанную живую культуру на синтетическую среду с сахарозой и добавлением инициирующих агентов или без них, обеспечивать синтез декстрана желаемого молекулярного веса.

Пример 1

Берется агарная питательная среда, поросшая Zenconostoc mesentегоides (5% сахарозы; 0, 5% HPO4*12 О; 0, 1% КС1, 0, 1% пептона; 1% автолизата дрожжей; дистиллированной воды до 100; рН 7). Бактериальные клетки отмываются физиологическим раствором поваренной соли и отгоняются на центрифуге. Затем производится декантация, и клетки обрабатываются вновь физиологическим раствором поваренной соли. Эта процедура отмывки повторяется до тех пор, пока в клеточной взвеси не остается осаждаемый декстран. Как правило, достаточны две промывки.

Затем клеточная взвесь прививается питательному прививочному раствору следующего состава: 1% лимонной кислоты, 0, 5% HPO4*12Н20, 0, 1% КС1, 0, 1% пептона, 1, 0% автолизата дрожжей, рН 7, дистиллированной воды до 100.

После того, как достигнута максимальная мутность, этот прививочный раствор добавляется в соотношении 1: 10 к синтетическому раствору следующего состава: 10% сахарозы, 2% первичного декстрана (молекулярный вес 20.000), 0, 5% HPO4*12Н20, 0, 1% КС1, 0, 1% пептона, 1, 0% автолизата дрожжей, рН 7, дистиллированной воды до 100.

Когда значение рН снизится до 3, 9, синтез можно считать законченным.

Пример 2

Управляемый синтез декстрана. Собственно, в ходе которого и образуется именно клинический декстран.

Прививочные растворы изготовляются в соответствии с примером 1. Названные углеродные источники (лимонная кислота, фруктоза, пропанол) могут быть заменены другими подходящими соединениями, как, например, эталон, уксусная кислота, винная кислота и молочная кислота. Прививочные растворы добавляются в соотношении 1: 10.

Синтез декстрана с расчетом на мол. вес 75000 (клинический декстран).

Синтетический раствор: 10% сахарозы, 2% первичного декстрана (остальные примеси как в первом случае).

Выход равен в среднем 90% расчетных теоретических показателей (мол. вес 75 000).