| Резко возросшая в последние годы культура расследований обусловила строгие требования к заключению эксперта как источнику доказательств по делу. Одна из особенностей судебно-медицинской экспертизы настоящего времени – это применение методов, позволяющих по минимальному количеству образцов или объектов получить необходимые данные для предельно полных, объективных и конкретных экспертных выводов. Это определяет и одно из важнейших направлений судебной медицины как науки на современном этапе ее развития; внимание исследователей стало концентрироваться на микрообъектах – разного рода микрочастицах и микроследах, природу которых судебные медики не могли раньше установить из-за отсутствия необходимых методик или неразработанности теоретических предпосылок к исследованиям.
Согласно УК вещественными доказательствами являются предметы, которые служили орудиями преступления или сохранили на себе следы преступления, или были объектами преступных действий, а также деньги и иные ценности, нажитые преступным путем, и все другие предметы, которые могут служить средствами к обнаружению преступления, установлению фактических обстоятельств дела, выявлению виновных либо опровержению обвинения или смягчению ответственности обвиняемого.
Судебно-медицинский эксперт исследует такие вещественные доказательства, как кровь, волосы, выделения и части организма человека.
Врачи – эксперты и даже судебно – медицинские эксперты общего профиля, не прошедшие специальной подготовки, исследовать вещественные доказательства не имеют права и не будут. Однако согласно нашему законодательству, любой врач может быть привлечен к выполнению обязанностей судебно-медицинского эксперта и должен уметь помочь следователю в обнаружении и изъятии следов, подозрительных на кровь, сперму, волосы и т.д.; должен оказать квалифицированную помощь судебно-следственным органам в выборе вопросов, которые ставятся перед экспертизой и в деле правильного истолкования результатов экспертизы вещественных доказательств.
Принципиальной основой правильного изъятия вещественных доказательств является необходимость полного сохранения обнаруженных следов.
Успех любого экспертного исследования определяется не только опытом и знаниями эксперта как специалиста или применением рациональных методик, но и состоянием объекта, подлежащего исследованию.
Различные предметы могут стать вещественными доказательствами лишь при условии их правильного процессуального оформления.
Уголовно-процессуальный кодекс регламентирует порядок и способы собирания вещественных доказательств. Такая регламентация необходима для обеспечения полноты выявления, точного закрепления в деле и сохранения в неизменном виде вещественных доказательств с момента их обнаружения. Эта регламентация также направлена на обеспечение и установление подлинности вещественных доказательств, исключение возможности их подмены или подделки.
Отысканию и судебно-медицинской оценке их при осмотре места происшествия и трупа, а также правильному изъятию для направления на исследование в судебно-медицинскую лабораторию врач должен уделить особое внимание. Допущенные при этом врачом упущения в дальнейшем не восстановимы.
При описании следов отмечается их локализация (на предметах одежды – применительно в их частям, на трупе – относительно положения трупа), форма, размеры, цвет, характер следа (пятна, брызги, потеки и т.д.) и другие особенности.
Принципиальным требованием при изъятии следов различного происхождения является применение таких методов, которые позволяют сохранить вещественные доказательства в неизменном виде и не влияют на специфические свойства. Это требование нужно соблюдать при упаковке и траспортировке собранного материала.
Упаковку и направление вещественных доказательств на экспертизу производит следовательсовместно с судебно-медицинским экспертом.
Доставку вещественных доказательств обеспечивает следователь лично, через посыльного или по почте (пользоваться оказией не разрешается).
Вещественные доказательства исследуют в биологическом отделении судебно-медицинской лаборатории бюро судебно-медицинской экспертизы врачи, получившие специальную подготовку. Экспертиза назначается постановлением следователя, органа дознания, прокурора либо определением суда. В постановлении должны быть подробно указаны обстоятельства дела и поставлены конкретные вопросы эксперту. К постановлению должны быть приложены копии протокола осмотра места происшествия, акта судебно-медицинского исследования трупа или освидетельствования живого лица, протокол изъятия образцов (крови, слюны, волос и др.).
При проведении осмотра врач должен четко представлять, какой вид и другие особенности имеют следы различного происхождения.
Следы крови. Бывают различные формы, это помогает установить механизм их образования. Пятна крови обычно возникают при пропитывании или смачивании пористых тканей (например, одежды). Помарки –результат соприкосновения испачканного кровью предмета или тела (например, руки) с другим предметом или телом человека. Потеки образуются при стекании крови в нижележащие отделы, движение потека направлено в сторону толстой капли. Лужи –результат значительного скопления крови – могут приобретать различные формы, размеры и толщину, характерны для обильных наружных кровотечений.
Капли крови при вертикальном падении с высоты до 1-1, 5 м образуют пятна круглой формы с ровными или мелкозазубренными краями, при падении с высоты 2-3 м вокруг круглого пятна возникают штрихообразные брызги. При падении капель крови под углом к поверхности образуются овальные пятна с брызгами, похожими на восклицательные знаки, тонкая часть которых направлена в сторону движения. Форму восклицательного знака имеют пятна при падении крови с движущегося предмета, например, при вращении колес автомашины, движении раненого и др.
При отыскании следов крови необходимо помнить, что с течением времени цвет их может изменяться, что связано с изменением красящего вещества крови – гемоглобина – под влиянием высыхания, влаги, прямых солнечных лучей и др. В первую минуту цвет крови красный. Спустя несколько часов он становится темно-красным, затем буреет. Через 2-3 дняпятно приобретает красновато-бурую окраску, на 8-10-й день все резче начинают выявляться бурые тона.Через 2-3 недели пятно приобретает бурый цвет, а через 2-3 месяца – грязновато-серовато-бурый.Через 6 месяцев и более – серовато-бурый.При загнивании могут появляться зеленоватые или грязно-зеленоватые оттенки. При прямом воздействии солнечных лучей эти изменения происходят быстрее.
Далеко не всегда пятна, подозрительные на следы крови, выявляются на вещественных доказательствах при осмотре невооруженным глазом. В таких случаях для обнаружения подозрительных на кровь следов обычно прибегают к осмотру в ультрафиолетовых лучах ртутно-кварцевой лампы. Пятна крови при этом выглядят темно-коричневыми, бархатистыми. И только если красящее вещество крови (гемоглобин) под влиянием внешних воздействий превратилось в продукт глубокого распада (гематопорфирин), пятна приобретают яркий оранжевый цвет.
Таким образом, исследование в ультрафиолетовых лучах является ориентировочной реакцией на кровь. Такими же по значимости будут химические пробы на ферменты(пероксидазу, каталазу), содержащиеся в крови, а также пробы с перекисью водорода и раствором бензидина.
Когда следы, подозрительные на кровь, обнаружены, осмотрены, описаны и зафиксированы, их необходимо изъять для направления на экспертизу.
Доказательные методыкровяного происхождения пятна основаны на обнаружении в нем с помощью спектрального исследования и микрокристаллических реакций гемоглобина и его производных – гемохромогена и гематопорфина.
Спектральное исследованиеосновано: на способности гемоглобина и его производных поглощать волны света определенной длины и давать соответствующие спектры поглощения. Постоянство и специфичность количества и расположения полос поглощения для каждого производного гемоглобина (гемохромогена, гематопорфирина) являются характерными признаками спектра. Применениемикрокристаллических реакцийосновано на способности некоторых производных гемоглобина образовывать характерные кристаллы. Эти реакции менее чувствительны, чем спектральное исследование, и в настоящее время в лабораториях практически не применяются.
Наличие крови в пятне обычно устанавливается микроспектральным исследованием с предварительным получением из красящего вещества крови гемохромогена или гематопорфирина. Исследование проводится с помощью микроспектроскопа (АУ-16, СПО-1), представляющего собой спектральную насадку на микроскоп.
Получение четкого спектра гемохромогена свидетельствует о наличии крови в пятне.
При исследовании пятен с малым содержанием кровиили замытых пятен, или крови, подвергшейся сильным внешним воздействиям, рекомендуют применять фенольную реакцию получения гемохромогена(Васильев М.А., 1960). Спектральная чувствительность полученного таким путем гемохромогена значительно выше.
При работе с небольшими пятнами крови М.А. Васильев предлагает производить не спектроскопическое, амикроспетрографиеское исследование, используя для этого спектрограф.
При отсутствии спектра гемохромогена переходятк выявлению спектра гематопорфирина.
В случаях, когда на пятне из-за небольшого количества крови не определяются участки, похожие на гематопорфирин, можно применитьисследование в ультрафиолетовых лучах с помощью специального люминисцентного микроскопа либо люминисцентных осветителей ОИ-17 или ОИ-18. В местах, обработанных концентрированной серной кислотой, при осмотре их в ультрафиолетовых и синих лучах при наличии гематопорфирина отмечается пурпурно-красное свечение. Такие участки в дальнейшем подвергают спектроскопии в видимых лучах для установления гематопорфирина.
В.Н. Виноградов (1958) показал возможность установления наличия крови методом флюоресцентной микроскопии. Появление у нефлюоресцирующего объекта после его обработки серной кислотой ярко-пурпурно-красного свечения свидетельствует о наличии крови.
При исследовании свежих пятенспектральное обнаружение наличия в них крови может производиться и без какой-либо предварительной обработки для обнаружения содержащегося в них оксигемоглобина.
В случае глубокого разрушения крови, например при обугливании вещественных доказательств, спектр гематопорфирина получить обычно уже не удается. В таких случаях для установления наличия крови предложено проведение эмиссионного спектрального исследования, когда наличие крови устанавливается по исследованию ряда элементов(Васильев М.А., 1962). М.В. Кисин (1974) предложил для установления наличия крови использовать метод тонкослойной хроматографии на пластинках со слоем водной кремниевой кислоты.При наличии в исследуемом материале крови на хроматограмме образуется пятно синего цвета.
Д.Д. Джалалов (1977, 1981) предложил устанавливать наличие крови при помощи метода восходящей хроматографии на бумаге. Метод позволяет получить положительный результат в тех случая, когда общепринятые способы установления наличия крови оказываются неэффективными. Принцип метода заключается в том, что растворитель, проходя через образцы, вырезанные из объектов исследования и укрепленные на стартовой линии полос хроматографической бумаги, разлагает кровь на компоненты, которые затем проявляются. Одновременно в тех же условиях исследуются предмет-носитель и установленное пятно крови.
Метод восходящей хроматографии на бумаге позволяет устанавливать наличие крови в сильно загрязненных или измененных объектах исследования. Метод чувствителен: зона красящего вещества отчетливо выделяется при исследовании 0, 01 мл разведенной в 50 раз крови. Гниение крови, действие прямых солнечных лучей, высокой температуры, ржавчины, хозяйственного мыла, различных химических веществ не препятствует обнаружению крови.
Д.Д. Джалаловым и Б.С. Абдуллаевым (1982) предложен серийный способ установления наличия крови в следахметодом непосредственной радиарной микрохроматографии на бумаге, позволяющий обнаружить пигмент крови в загрязненных и старых пятнах крови на тканях, подвергшихся стирке и другим воздействиям. Полученная хроматограмма может храниться длительное время как вещественное подтверждение результатов исследования.
Следовательно, наиболее эффективным методомустановления наличия крови в пятнах являются спектральное и хроматографическое исследование. Спектральный метод специфичен, достаточно чувствителен, при нем расходуется небольшое количество материала, причем на результаты исследования в меньшей степени влияют изменения крови и присутствие примесей. Получение спектра того или иного производного гемоглобина свидетельствует о наличии крови. При отрицательном результате исследования необходимо еще раз проверить все реактивы и реакции с кровью. Отрицательные результаты микроспектрального исследования не дают оснований делать вывод об отсутствии крови на объекте исследования, так как это может быть вызвано сильным разрушением крови или наличием ее в таком ничтожно малом количестве, которое делает невозможным ее выявление в видимой части спектра. В таких случаях эксперты и делают заключение о необнаружении следов крови. Микрокристаллические реакции используют лишь в случаях выявления следов крови на металлических предметах, содержащих железо, поскольку обработка препаратов высокосернистым аммонием при микроспектральном исследовании гемохромогена ведет к образованию сульфита железа, препятствующего изучению его спектра. Отрицательные микрокристаллические реакции вследствие их непостоянства и ориентировочного характера нельзя расценивать как отсутствие крови. В подобных случаях эксперт может сделать заключение лишь о необнаружении крови при помощи таких реакций. Хроматографические методы выявления крови гораздо более чувствительны и позволяют обнаруживать пигмент крови в смешанных и старых пятнах при одновременном исследовании большого количества объектов.
Для определения видовой специфики кровив судебно-медицинской практике, как правило, применяют иммунологические методы исследования, в частности реакцию преципитации.
После открытия Ф.Я. Чистовичем (1899) видовой антигенной специфичности сывороточных белков судебная медицина получила научно обоснованный метод дифференцирования крови человека и животных. Естественнонаучные основы видовых антигенов рассмотрены в статье М.И. Потапова, Т.А. Куприной, Е.Р. Сигал (1985). Единый видоспецифический антиген (ВСА) обнаружен не был. Существуют множественные специфические антигенные детерминаты белков сыворотки крови, к каждому из которых могут быть изготовлены моноспецифические антифракционные гетероиммунные сыворотки.
Реакция преципитацииявляется одной из реакций иммунитета, при которой происходит взаимодействие антигенов и антител. При определении видовой специфичности крови антигенами являются главным образом сывороточные белки - альбумины и глобулины, а антителами – иммунные глобулины преципитирующей сыворотки.
Видовая специфичность присуща не только белкам крови, но и различным белковым субстанциям выделений – спермы, слюны, пота, мочи, выделений из носа, влагалища и т.д.
Реакцию преципитацииможно выполнить в нескольких вариантах: в жидкой среде и в геле.
Принцип реакции следующий: соответствующие по виду антигены (преципитиногены) и антитела (преципитины) реагируют между собой. При этом на границе указанных сред возникает беловатый осадок (преципитат), имеющий форму кольца.
Иммунные сыворотки должны быть прозрачными и специфичными – давать выраженную реакцию преципитации с соответствующим преципитоногеном при разведении 1: 1000 в пределах 1-2 мин, в разведении 1: 10000 – через 8-10 мин.
Иммунные сыворотки, не отвечающие этим условиям, применять нельзя.
Реакция преципитации производится как с вытяжкой из пятна, в которомпредполагается кровь, так и с вытяжкой из участка исследуемого предмета вне пятна. Это нужно для того, чтобы исключить влияние на ход реакции самого материала, подвергающегося исследованию.
Если вытяжка из исследуемого на кровь объекта мутна даже после центрифугирования, применяют реакцию преципитации в геле, которая высоко специфична, позволяет исследовать даже загрязненные, мутные, опалесцирующие вытяжки из пятна.
При специфическом взаимодействии антитела и антигена в агаре в месте соприкосновения вытяжки из объекта и преципитирующей сыворотки, в промежутке между соответствующими лунками образуется поперечно расположенная белая полоса преципитата. Реакция преципитации в геле весьма проста, но длительна (более суток).
Можно применить метод встречного иммуноэлектрофореза, снижающий время реакции преципитации в геле до 45-90 мин. Метод заключается в том, что при электрофорезе иммунных сывороток в геле антитела, содержащие глобулиновые фракции, вследствие эндоосмоса перемещаются от анода к катоду, а большинство антигенов – от катода к аноду. Будучи одновременно внесенными в гель, соответствующие антитела и антигены под действием электрического тока движутся навстречу друг другу и образуют преципитаты. В результате между исследуемой кровью и соответствующей преципитирующей сывороткой образуется одна или две дугообразные полосы преципитата.
В.И. Чарный и Г.М. Сулейманова (1964) для дифференцирования крови филогенетически близких животных предложили использовать реакцию торможения преципитации, сравнительную реакцию преципитации и иммуноэлектрофорез.
Реакция торможения преципитации. Сущность реакции заключается во введении в гель избытка антигена, реакцию с которым хотят исключить. Однако это не препятствует наступлению реакции преципитации с другим антигеном. Реакция торможения преципитации осуществляется в агаре по методу Оухтерлони.
Сравнительная реакция преципитации. Сущность такой реакции заключается в следующем. В случаях, когда преципитирующая сыворотка содержит антитела, аналогичные сравниваемым антигенам, зона преципитата образует общий фронт антител – дает одну общую полосу преципитации. Если сравниваемые антигены отличны, слияния линий преципитации не наблюдается. В этом случае они перекрещиваются. При частичном сходстве антигенов, кроме общей полосы преципитации, образуется шпора за счет компонентов, имеющихся только у одного из антигенов.
В последнее время широкое распространение получил метод встречного электрофореза на ацетатцеллюлозной пленке.Метод является рациональным, особенно при использовании небольших количеств исследуемого материала. В основе метода лежит образование иммунных специфических нерастворимых преципитатов в результате миграции антигенов и антител навстречу друг другу под воздействием электрического поля. Использование пленок имеет ряд преимуществ по сравнению с применением других материалов, а именно: ацетатцеллюлозная пленка готова к использованию, отличается однородностью структуры, отсутствием абсорбации белка, стабильностью физико-химических свойств; результаты исследования могут сохраняться в течении длительного времени.
Реакция иммунофлюоресценцииосновывается на люминесценции антител, меченных различными флюорохромами, при этом антитела вступают в контакт с антигенами на поверхности объектов исследования.
Реакция иммунофлюоресценции обладает рядом преимуществ - она включает только фазу абсорбции, указывает место расположения антигена непосредственно в клетке, позволяет определять видовую и групповую принадлежность антигенов в изолированной клетке.
Существуют два варианта реакции иммунофлюоресценции:
1. прямая – при непосредственном контакте антигена с гемологической люминесцирующей сывороткой, с удалением непрореагировавших антител (реакция не нашла практического применения, так как для выявления соответствующих антигенов требуется своя люминесцирующая сыворотка);
2. непрямая, состоящая из двух этапов. Первый этап включает контакт антигена с нелюминесцирующей сывороткой, удаление непрореагировавших антител, второй – последующую обработку объектов исследования люминисцирующей сывороткой, антитела которой гомологичны белку сыворотки, использованной на первом этапе.
Для определения антигенов микробных телприменяется еще и третий вариант реакции иммунофлюоресценции с выявлением образовавшегося комплекса антиген – антитело с помощью комплимента.
Несмотря на высокую чувствительность и совершенно очевидные преимущества, реакция иммунофлюоресценции еще не получила широкого распространения в судебной медицине, что прежде всего обусловлено недостаточной разработкой всех этапов реакции применительно к специфичности вводных ингредиентов.
Определение групповой принадлежности крови проводят для выявления возможности ее происхождения от определенного лица. В эритроцитарных, сывороточных и ферментных системах крови содержится большое число передающихся по наследству антигенов (белков), определенное сочетание которых в каждой системе характеризует ту или иную группу крови. Групповую принадлежность определяют как в следах крови на вещественных доказательствах, так и в при сданных образцах крови, изъятых у потерпевших и подозреваемых. Сопоставление антигенного набора крови в различных системах в исследуемых следах и в образцах позволяет высказываться о возможности или невозможности происхождения следов крови на вещественных доказательствах от конкретного лица.
Эритроцитарные группы. В следах крови в настоящее время выявляются группы эритроцитарных систем ABO, MNSs, P, Льюис, резус.
СистемаABO благодаря высокому полиморфизму и исключительной устойчивости ее антигенов к внешним воздействиям имеет первостепенное значение для дифференциации следов крови.
Как установлено, в эритроцитах большинства людей с группами А (II), В (III) и АВo(IV) содержится сопутствующий антиген Н, близкий по своей природе к антигену 0. Поэтому систему АВО на сегодня принято рассматривать как систему АВО (Н). Определение антигена Н существенно расширило возможности групповой дифференциации следов крови. В свою очередь изучение особенностей антигена А позволило подразделять его на А1 (А ”сильное“) и А2 (А ”слабое“), что значительно расширяет групповую дифференциацию следов крови. Методика дифференцирования подгрупп системы АВО с помощью специальных растительных фитоаглютининов (лектинов) впервые разработана в нашей стране.
Выявление антигенов системы АВО (Н) производится тремя основными методами: количественный метод абсорбции агглютинов прост, позволяет избежать влияния различных загрязнений предмета-носителя, но недостаточно чувствителен; серологические методы абсорбции-элюции и смешанной агглютинации весьма чувствительны и в основном применяются для установления групповой принадлежности крови в следах малого размера. Эти методы основаны на способности антител a иb абсорбироваться соответствующими антигенами А и В.
Реакции абсорбции-элюции и смешанной агглютинации позволяют последовательно в одном и том же материале исследовать антигены нескольких эритроцитарных систем.
Система MNSs имеет девять групп: MNSs, MNs, Ns, MSs, Ms, Ms, NSs, MNs и Ns. Вследствие благоприятной частоты распределения среди населения система является весьма информативной для судебно-медицинской групповой идентификации. В настоящее время для выявления антигенов системы MNSs в следах крови довольно успешно применяются методы абсорбции-элюции и смешанной агглютинации с использованием диагностических сывороток.
Система P используется также для определения групповой принадлежности крови. Антиген P недостаточно устойчив к воздействию факторов внешней среды и присутствует в эритроцитах примерно у 70-80% европейского населения. Для определения групповой принадлежности следов крови по системе P требуется 40-50 мг пятна крови.
Система Льюис (Lе) характеризуется четырьмя антигенами – Lе (а), Lе (b), Lе (с), Lе (d), причем в крови каждого человека обязательно cодержится один из этих антигенов, что обуславливает наличие в этой системе четырех групп крови Lе (а+), Lе (b+), Lе (с+) Lе (d+) со средней частотой встречаемости соответственно 25, 60, 12 и 3%.
В качестве особенности этой системы следует отметить ее связь с явлением выделительства групповых антигенов системы ABO (H).
Примерно 85% людей являются выделителями своих групповых антигенов системы ABO (H). Это значит, что во всех выделениях (сперма, слюна, пот, выделения влагалища, моча) человека, являющегося выделителем, содержится групповой антиген системы ABO. В выделениях человека с этой же группой A (II) крови, но относящегося к невыделителям, антиген A будет отсутствовать либо будет выражен слабо.
У живых лиц категорию выделительства обычно определяют по выраженности групповых антигенов системы ABO (H) в образцах их слюны. У трупов она определяется по трупной крови посредством выделения в ней групповых антигенов системы Льюис. Установлено, что лица с группами Lе (b+) и Lе (d+) всегда являются выделителями групповых антигенов системы ABO (H), а в группах Lе (а+) и Lе (с+) - невыделителями.
Группы системы Льюисв эритроцитах крови человека формируютсядовольно поздно, к 6-7 годам. В крови новорожденныхи детей первых дней жизни часто содержатся два антигена этой системы – Lе (а) и Lе (b), что может быть использовано для дифференциации крови взрослого человека и новорожденного.
Система резуссодержит наследуемых антигенов. Ее антигены в различных сочетаниях образуют около 100 возможных групп крови.
В следах крови антигены системы резус выявлять сложно из-за малой их устойчивости и отсутствия высокочувствительных сывороток, специфически открывающих определенный антиген. Наиболее устойчивым является антиген D, в связи с чем диагностика групп резус в следах практически сводится в настоящее время к выявлению лишь этого антигена методом абсорбции-элюции.
Сывороточные группы. К настоящему времени установлено более десяти сывороточных систем, имеющих сывороточные группы крови. Однако в экспертной практике при исследовании пятен крови применяются лишь три из них: система гаптоглобина (Hp), гамма-иммуноглобулина (Gm) и группо-специфического компонента (Gc).
Группы гаптоглобина определяются методом электрофореза в крахмальном или полиакриламидном геле лишь в пятнах небольшой давности – 1-2 мес.
Гамма-иммуноглобулиновая система состоит из 23 передающихся по наследству антигенов, сочетание которых обуславливает большое количество возможных групп этой системы. Антигены этой системы весьма устойчивы к воздействию факторов внешней среды и могут выявляться в пятнах двухлетней давности.
В системе группоспецифического компонента Gсразличают три группы со средней частотой встречаемости соответственно 45, 46 и 10%. Антигены системы Gc недостаточно стойки и определяются лишь в свежих пятнах крови с давностью образования 1-2 мес.
Ферменты группы. В ряде эритроцитарных сывороточных ферментов систем крови выявлены передающиеся по наследству группы, которые могут быть определены в пятнах крови небольшой давности. Из ферментов эритроцитов наиболее стойкие в пятнах крови фосфоглюконат-дегидрогеназа, выявляемая в следах крови 2-3-месячной давности, и аденилаткиназа, открываемая в следах крови давностью до 1 года. Группы холикостеразы открываются в следах крови 3-4-месячной давности. Щелочная фосфатаза сыворотки крови связана с категориями выделительства.
В основе дифференциации крови взрослого человека и плодалежат различия физико-химических и электрофоретических свойств содержащегося в их крови гемоглобина, выражающиеся в различной скорости его миграции при электрофоретическом разделении в геле агара или крахмала, а также в различной степени устойчивости к действию щелочей (плодный гемоглобин HbE более устойчив к действию щелочей). Дифференциация крови взрослого человека от крови младенца возможна лишь до года и лишь в пятнах давностью образования не выше 2-3 нед.
Дифференциация крови взрослого человека и новорожденного возможна также путем выявления в детской крови особого белка LI-фетопротеина, отсутствующего в крови взрослых людей. Кровь взрослого и ребенка можно также различать по активности отдельных ферментов крови.
Установление давности образования пятен кровиосновано на изменении при ”старении“ крови свойств гемоглобина (последовательное его превращение из оксигемоглобина в метгемоглобин, гематин, карбоксигемоглобин, гемохромоген и гематопорфирин). Указанным производным гемоглобина присущи характерные спектры поглощения. На основании этих особенностей и проводится, с учетом конкретных условий нахождения предметов со следами крови, ориентировочное установление давности образования пятна.
Метод геномной дактилоскопии. В восьмидесятых годах английскими исследователями в геноме человека были обнаружены последовательности ДНК, обладающие свойством структурного полиморфизма. Такие гипервариабельные районы (ГВР) содержат набор коротких, обычно богатых гуанин-питозином, тандемно-повторенных единиц. Копированные участки ГВР были использованы для приготовления проб (зондов), которые при гибридизации с геномной ДНК в мягких условиях выявляют множественные аллели к ГВР. Получающийся сложный набор гипервариабельных полос заключает в себе специфичную для данного индивидуума картину геномного ”дактоотпечатка“. Установлено, что аллели, формирующие эту картину, обладают соматической стабильностью, они стабильны в клетках зародышевого пути и наследуются в соответствии с законами Менделя. Индивидуальный характер гибридизационной картины позволяет использовать метод в судебной медицине для определения видовой, половой и индивидуальной принадлежности биоматериала по ДНК из любых клеточных тканей (кроме эритроцитов крови, установления отцовства и материнства).
Установление регионарного происхождениякрови, т.е. области, из которой выделялась кровь, обнаруженная при осмотре, основывается на выявлении морфологических элементов, свойственных тому или иному участку ткани. Так, присутствие клеток слизистой оболочки дыхательных путей свидетельствует об истечении крови из органов дыхания, примесь в крови кала - желудочно-кишечном кровотечении; на наличие менструальной крови указывает содержание в ней клеток слизистой оболочки матки. Для отличия менструальной крови от крови иного происхождения предложены такие лабораторные исследования: обнаружение фибринолитического фермента, определение по остаточному азоту, электрофорез, эмиссионный спектральный анализ и др. Решение этого вопроса чрезвычайно важно, ибо в некоторых случаях подозреваемый в совершении преступления, не отрицая присутствия крови, объясняет ее происхождение носовым, легочным, геморроидальным или менструальным кровотечением.
Установление пола человека, которому принадлежит кровь, производят, определяя половой хроматин в ядрах клеток лейкоцитов. Это возможно не только по жидкой крови или сгусткам, но в небольшие сроки по пятнам, обнаруженным на почве.
В 1968 г. Caspersson была разработана методика выявления мужского полового хроматина (У-хроматина), а в 1970 г. P.L. Peanson доказал возможность диагностики пола человека по содержанию У-хроматина в соматических клетках. Установлено, что в мужских клетках У-хроматин встречается в 22-100% ядер, в женских – 1-2%. Он четко выявляется при люминесцентной микроскопии препаратов, окрашенный атебрином или акрихин - ипритом.
В крови половые различия отмечаются в ядрах лейкоцитов и нейтрофилах женской крови характерными ядерными отростками А и Б.
Может возникнуть надобность в определении количества жидкой крови, необходимой для образования конкретного пятна (пятен) на вещественных доказательствах. Точных методов разрешения этого вопроса не существует. Ориентировочное значение могут иметь данные, полученные при определении сухого остатка крови в пятне с последующим перерасчетом на количество жидкой крови (исходя из того, что 100 мл жидкой крови в среднем соотвествуют 211 г сухого остатка).
|
| Необходимость в судебно-медицинском исследовании волос возникает при обнаружении их на орудиях травмы, транспортных средствах, на одежде и теле подозреваемых и потерпевших при различных преступлениях и в других случаях, когда волосы могут быть вещественными доказательствами по делу.
Волосы обнаруживаются на месте происшествия на отдельных предметах, на орудиях преступления, на руках и одежде жертвы, на одежде преступника, а при половых преступлениях - на белье и в других местах.
Волосы осматривают, отмечают свойства и особенности волос (цвет, загрязнение и т.) и место нахождения. Каждый волос или пучок снимают пальцами или пинцетом с резиновыми наконечниками и вкладывают в отдельные пакеты или конверты, и делают соответствующие надписи.
Для решения вопроса о возможности происхождения волос от определенного лица для сравнения исследуют волосы с головы или других частей тела (в зависимости от существа дела) потерпевших и обвиняемых лиц. Волосы с головы должны быть взяты не менее чем с пяти областей: лобной, теменной, затылочной, правой и левой височных, а также из участков повреждений.
При исследовании волос могут быть разрешены следующие вопросы: являются ли присланные объекты волосами, кому принадлежит волос – человеку или животному; если животному, то по возможности установить, какому именно; если человеку, то с какой части тела волосы происходят и не обнаруживают ли сходства с волосами подозреваемого или потерпевшего; вырваны они или выпали; нет ли признаков повреждения волос; не подвергались ли искусственной окраске и т.п.
По внешнему виду волосы могут быть похожи на растительные и искусственные волокна: искусственный шелк, шерсть, лен, хлопок и др. Дифференцировку проводят на основании строения волос.
Принадлежность волос человеку или животному определяется по разнице строения волосчеловека и животных, а такжепо содержанию микроэлементовметодом эмиссионно-спектрального анализа (волосы человека наиболее богаты алюминием) и по результатам химического воздействия на волосы растворами сульфата железа, уксусной кислоты и пергидроля, после чего выявляются характерные особенности в строении коркового слоя волос, позволяющие отличить их от шерсти животных.
В волосах человека кутикула представляется в виде плотно прилежащих друг к другу безъядерных ороговевших клеток в виде мелких тонких чешуек, а у животных клетки кутикулы крупные, иногда своеобразной формы. Рисунок кутикулы различен в волосах разных людей и неодинаков на протяжении волоса. В корковой части линии рисунка кутикулы обычно маловолнисты и незначительно зазубрены. По мере приближения к периферическому концу волнистость и зазубренность возрастают. Зубчатость контуров волос мелкая, плохо различима, в то время как у животных она чаще всего крупная и хорошо заметна.
Корковое вещество в волосах человека составляет основную массу волос, пигмент расположен главным образом в периферической части коркового слоя. В волосах животных корковое вещество тонкое, основную массу составляет сердцевина, а расположение пигмента преимущественно центральное.
Сердцевина волосчеловека узкая, толщина ее относится к общей толще волос как 1: 10 – 3, 5-10, реже как 5: 10, многократно прерывается, часто имеет вид отдельных островков, неравномерна по толщине, образует на протяжении волоса сужения и расширения. Мелкие клетки сердцевины тесно расположены в несколько рядов. При микроскопическом исследовании невозможно различить определенную структуру. В волосах животных клетки сердцевины соединены между собой по определенной системе, иногда разделены промежуточным веществом, довольно крупны; поверхность их, обращенная к корковому слою, имеет различную форму и величину. Сердцевина широкая, отношение ее к общей толщине волоса - от 5: 10 до 9: 10, в большинстве случаев представлена в виде непрерывного тяжа, проходящего по всей длине волоса, исключая корневой конец и верхушку. Она равномерна по толщине
Для определения, какой части тела человекапринадлежат исследуемые волосы, принимают во внимание форму, длину, толщину, характер свободных концов, форму поперечных срезов и различные особенности, обусловленные локализацией волос. Толщина волос на различных частях тела неодинакова. Волосы бороды, усов, бакенбард – наиболее толстые (0, 14-0, 16 мм), на голове они тоньше (обычно не превышают 0, 10 мм), самые тонкие – пушковые (около 0, 02 мм). Форма поперечного сечения волос в некоторой степени характеризует их локализацию. Волосы головы на поперечном сечении имеют круглую или овальную форму, бороды и усов - неправильную треугольную, четырехугольную, многоугольную, лобка – почкообразную или удлиненноовальную.
К числу особенностей, характеризующих область, из которой произошли волосы, относятся: зашлифованность периферического конца волос на частях тела, прикрытых одеждой, отложение солей и внедрение грибков и микробов в кутикулу, что чаще наблюдается в волосах из подмышечной впадины и промежности, следы искусственной окраски и завивки в волосах головы.
Установление регионального происхождения волос возможно только по совокупности всех данных, а не по одному какому-либо признаку.
Волосы человека могут выпадать сами по себе, так как ограничена их жизнеспособность, например, для волос головы такой срок составляет 2-4 года.
Различные внешние воздействия вызывают на волосах различные повреждения. От тупых орудий волос раздваивается, расщепляется, при обрыве быстрым движением волос имеет ровную поверхность отделения. От действия высокой температуры волос становится толстым, вздувается, в отдельных местах появляются пузырьки воздуха, волос светлеет, затем буреет, чернеет и скручивается.
Определение групповой принадлежности волос производится по выявлению в стержнях их, а также во влагалищных оболочках (если волосы вырваны) антигенов системы ABO.
Половая принадлежность волос может быть установлена по обнаружению X-и Y-хроматина в клеточных ядрах влагалищных оболочек. Заслуживают внимания также методы, направленные на выявление половых различий в элементном составе волос. Так, Н.Г. Петросян и А.К. Туманов (1974) путем атомно-абсорбционного анализа установили, что в мужских волосах, по сравнению с женскими, содержится в среднем в 2-4 раза меньше кальция, магния и в полтора раза меньше натрия.
На современном этапе развития судебно-медицинской науки и экспертной практики представляется возможным установить принадлежность изучаемых волос конкретному человеку, используя модификации метода геномной дактилоскопии.
СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКАЯ ЭКСПЕРТИЗА СПЕРМЫ
В делах о половых преступлениях вещественными доказательствами являются следы спермы, которые могут быть обнаружены на теле и одежде потерпевших и обвиняемых лиц, а также на различных предметах на месте совершения преступления. Обнаружение следов спермы на вещественных доказательствах не всегда является легкой задачей и требует тщательного осмотра. Семенные пятна, образовавшиеся на светлых текстильных тканях, имеют сероватый или желтоватый цвет, наиболее интенсивный в периферических частях пятен. На темных тканях они представляются беловатыми. Характерными свойствами семенных пятен являются их извилистые, так называемые ландкартообразные, очертания и жестковатость, как бы накрахмаленность ткани, где образовалось пятно. На ворсистых тканях сперма подсыхает в виде блестящих беловатых корочек.
При освидетельствовании изнасилованных семенная жидкость может быть найдена во влагалище. В таких случаях следует брать содержимое влагалища на тампоны. Во влагалище сперма сохраняется до 2-3-5 дней.
Изъятие, сохранение, упаковку и пересылкувещественных доказательств со следами спермы производят так же, как ивещественных доказательств со следами крови.При экспертизе следов спермы разрешают следующие вопросы: имеется ли сперма на вещественных доказательствах, к какой группе относится и может ли происходить от определенного лица.
Для ориентировки, когда на ткани много различного рода пятен или когда они не выявляются при осмотре невооруженным глазом, используют освещение кварцевой лампы с целью выявления наиболее подозрительных на сперму следов. В ультрафиолетовых лучах пятна спермы флюоресцируют голубоватым светом. Но надо помнить, что такое же свечение дают и некоторые другие вещества. Для установления спермы могут применяться предварительные ориентировочные микрокристаллические реакции(проба Флоранса) и доказательные – обнаружение сперматозоидов.
Наиболее распространенной предварительной пробой для установления семенной природы исследуемых пятен является реакция задержки агглютинации эритроцитов фитагглютининами картофельного сока, разработанная Л.О. Барсегянц (1967). Принцип реакции заключается в том, что содержащаяся в картофельном соке аскорбиновая кислота (витамин С) является своеобразным фитаглютинином, взаимодействующим с эритроцитами крови человека независимо от их антигенной принадлежности по системе ABO. Тестостерон спермы, содержащийся в сперматозоидах и семенной плазме, активно блокирует агглютинирующее действие витамина С. В связи с этим в вытяжке из пятна спермы после добавления картофельного экстракта, а затем и тест-эритроцитов, агглютинация последних не наступает. Данная реакцияспособствует выявлению следов, похожих на сперму, и особенно ценна в случаях присутствия ее в смеси с пятнами крови, когда ни визуально, ни с помощью ультрафиолетовых лучей ее нельзя обнаружить.
В качестве вспомогательнойреакции при обнаружении следов спермы В.И. Чарный (1965) предложил реакцию на кислую предстательную фосфатазу.Реакция основана на том, что этот фермент присутствует в семенной жидкости в значительно больших количествах по сравнению с другими выделениями организма человека.
Вид белкав пятне спермы в случае необходимости может быть определен при помощи реакции преципитацииЧистовича-Уленгута, а также при микроскопическом изучении. Сперматозоиды человека очень характерны и резко отличаются от сперматозоидов животных. При невыявлении сперматозоидовв исследуемом пятне морфологическим методом используют другие методы – ферментный метод обнаружения специфического для семенной плазмы фермента лактатдегидрогеназы (ЛДГ), метод выявления особых белков – холина и спермина, характерных для спермы. Ферментный методпозволяет выявлять пятна спермы лишь незначительной давности. В настоящее время разрабатываются методы, позволяющие выявлять в пятне спермы отдельные белковые фракции, присущие только сперме. В экспертную практику такие методы пока не внедрены. Имеются также методы, позволяющие устанавливать происхождение пятен крови от спермы на основании обнаружения присущих ей микроэлементов (эмиссионно-спектральные исследования).
Сперма, как и другие жидкости организма, обладает групповыми свойствами, причем группа спермы каждого индивида не всегда соответствует группе его крови. Агглютиногены A и B в семенной жидкости чаще имеют более высокий титр, чем в крови. Однако у некоторых людей групповые факторы в сперме и в других выделениях бывают выражены слабо, что необходимо учитывать при оценке полученных результатов.
При экспертизе групповой принадлежности спермы производят определение группы крови потерпевшей и обвиняемого (в жидком и высушенном состоянии), выявление степени ”выделительства“ агглютиногенов подозреваемого и потерпевшей путем исследования их слюны, высушенной на марле, а у слабых ”выделителей“ – исследование и образца спермы обвиняемого, а затем установление групповой принадлежности спермы в следах на вещественных доказательствах.
Установление групповой принадлежности позволяет как исключить происхождение спермы от подозреваемого, так и установить такую возможность, категорически не утверждая, ибо такую же группу ”выделительства“ могут иметь и другие лица.
ИССЛЕДОВАНИЕ ВЫДЕЛЕНИЙ ЧЕЛОВЕКА
Любые выделения человека – слюна, влагалищное содержимое, кал (в том числе – меконий), пот, моча, молозиво и др. - могут быть объектами судебно-медицинской экспертизы.
Для обнаружения этих следов применяют макроскопический осмотр – невооруженным глазом и с помощью лупы, а также исследование в ультрафиолетовых лучах.
Слюна. Присутствие слюны приходится устанавливать, например, при решении вопроса, не был ли использован тот или иной предмет в качестве кляпа, не обнаруживается ли она на конвертах по краю клапана, марках и др. Для доказательства присутствия слюны в пятнах используют содержание в ней амилазы (птиалина). При установлении групповой принадлежности слюны следует учитывать степень ”выделительства“.
Пот. В исследовании пота возникает необходимость при решении вопроса о принадлежности определенному лицу того или иного предмета, обнаруженного на месте происшествия. Наличие пота доказывается по аминокислоте – серину, которого много содержится в поте, меньше в крови и моче. Группа пота устанавливается по выявлению агглютиногенов изосерологической системы A, B, O.
Моча. В практике следственных органов встречается необходимость выяснить, не происходят ли пятна от мочи. Наличие мочи устанавливается по ангидриду метилгуанидиноуксусной кислоты - креатину, который в значительно меньших количествах содержится также в поте, крови и пр. Методика определения группы мочи несколько изменена, так как обычный метод абсорбции не применим ввиду гемолиза в этих случаях стандартных эритроцитов. О групповой принадлежности пятен мочи и о возможности происхождения их от определенного лица следует судить на основании данных всех исследований с учетом степени ”выделительства“ подозреваемого лица.
Исследование костей.Объектами исследования бывают обычно мелкие отломки костей. Видовое определение их производят на основании гистологического исследования и реакцией преципитации Чистовича-Уленгута, а групповое – по групповым агглютиногенам.
Ткани.Обнаруженные в виде отдельных кусочков на орудиях преступления, на автомашине и других предметах подвергают судебно-гистологическому исследованию для определения, из какого органа произошли эти кусочки ткани. Производят также определение их видовой и групповой принадлежности.
Исследование кала производят микроскопически для обнаружения пищевых остатков (мышечные волокна, растительная клетчатка, кутикулярные образования, жир, кристаллы фосфорокислой аммиак-магнезии, желчные пигменты, клетки слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта и др.).
|
