и мясных продуктов

Цель работы. Освоить методы определения степени кулинарной готовности мяса и мясных продуктов.

Задачи. Определить кулинарную готовность мясных продуктов арбитражным методом. Дать оценку кулинарной готовности вареных мясных продуктов или колбасных изделий.

Объекты исследования. Вареное мясо, мясные продукты, колбасные изделия.

Материалы, реактивы и оборудование. Весы лабораторные с наибольшим пределом взвешивания 200 г; потенциометр; фотоэлектроколориметр или спектрофотометр; ультратермостат или водяная баня, обеспечивающие регулирование температуры от 30 до 99 ⁰С; воронки; колбы мерные вместимостью 500 и 1000 см³; пипетки, колбы, пробирки; палочки стеклянные; бумага фильтровальная лабораторная; груша резиновая; кислота лимонная; цитрат натрия 5-водный; свежеприготовленный раствор динатриевой соли фенилфосфорной кислоты концентрацией 2 г/дм³; растворы трихлоруксусной кислоты концентрацией 50 и 200 г/дм³; раствор гидроксида натрия молярной концентрацией 0, 5 моль/дм³; вода дистиллированная; фенол; толуол; вольфрамат натрия 2-водный; молибдат натрия; сульфат лития 1-водный; кислота ортофосфорная плотностью 1, 72 г/см³; кислота соляная плотностью 1, 19 г/см³; бром.

Приготовление реактивов. Цитратный буфер (рН 6, 5): 13, 88 г цитрата натрия и 0, 588 г лимонной кислоты растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 1 дм³, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают, затем добавляют 1 см³ толуола. Раствор хранят в холодильнике при (4 ± 1) ⁰С не более 12 сут.

Стандартный раствор фенола: взвешивают 2 г фенола (с точностью до третьего десятичного знака), растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 дм³, доводят объем дистиллированной водой до метки и перемешивают. Отбирают пипеткой с помощью резиновой груши 5 см³ раствора в колбу вместимостью 500 см³, добавляют около 300 см³ дистиллированной воды, вносят 25 г кристаллической трихлоруксусной кислоты. После растворения содержимое колбы доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. Полученный раствор содержит 20 мкг фенола в 1 см³.

Реактив Фолина: 100 г вольфрамата натрия и 25 г молибдата натрия вносят в круглодонную колбу вместимостью 2 дм³ с пришлифованным обратным холодильником, добавляют 700 см³ дистиллированной воды, 50 см³ раствора ортофосфорной кислоты плотностью 1, 869 г/см³, массовой долей 85 % и 100 см³ концентрированной соляной кислоты; смесь кипятят на слабом огне на асбестовой сетке в течение 10ч, охлаждают, переносят в колбу Эрленмейера, стенки колбы и холодильник ополаскивают 50 см³ воды, затем туда же добавляют 150 г сульфата лития и 5 капель брома. Открытую колбу нагревают и содержимое кипятят на слабом огне в течение 15—20 мин под тягой, чтобы удалить пары брома (раствор должен иметь желтую окраску, если раствор зеленый, то обработку бромом повторяют). После охлаждения объем раствора доводят дистиллированной водой до 1 дм³ и фильтруют через трубку Аллина, заполненную стекловатой. Концентрацию кислоты проверяют i итрованием разбавленного в десять раз реактива Фолина раствором гидроксида натрия молярной концентрацией 0, 1 моль/дм³ по фенолфталеину. Приготовленный раствор хранят в склянке из темного стекла.

Рабочий раствор Фолина: готовят разведением основного раствора дистиллированной водой в два раза.

Методические указания. Принятые режимы тепловой обработки вареных колбас и мясных продуктов предусматривают инактивацию тканевых ферментов. В случае разногласий в оценке кулинарной готовности вареных продуктов прибегают к использованию методов, позволяющих определить остаточную активность ферментов.

Арбитражный метод основан на фотометрическом определении в продукте интенсивности развивающейся окраски, зависящей от остаточной активности кислой фосфатазы, выраженной массовой долей фенола.

Подготовка проб. Образцы продуктов из свинины освобождают от жировой ткани и шкурки, пробы вареных колбас, сосисок и сарделек — от оболочки и шпика. Пробы дважды измельчают на мясорубке, тщательно перемешивают, помещают в стеклянную или пластмассовую банку с крышкой и хранят при температуре (4 ± 2) ⁰С до окончания анализа.

Порядок проведения анализа. От каждой пробы отбирают две навески по 1 г, взвешенные с точностью до 0, 001 г, переносят в две пробирки, одна из которых является опытной, а вторая — контрольной.

В пробирки вносят по 10 см³ цитратного буфера рН 6, 5, тщательно перемешивают стеклянной палочкой и настаивают в течение 20 мин при комнатной температуре, периодически перемешивая.

В контрольную пробирку добавляют 5 см³ раствора трихлоруксусной кислоты концентрацией 200 г/дм³, перемешивают и добавляют 5 см³ раствора динатриевой соли фенилфосфорной кислоты концентрацией 2 г/дм³, выдерживают в течение 10 мин и фильтруют.

В опытную пробирку вносят 5 см³ раствора динатриевой соли фенилфосфорной кислоты концентрацией 2 г/дм³. Пробирку помещают в ультратермостат при температуре (39 ± 1) °С на 1ч, затем добавляют 5 см³ раствора трихлоруксусной кислоты концентрацией 200 г/дм³, выдерживают 10 мин и фильтруют.

Для проведения цветной реакции из контрольной и опытной проб отбирают по 2, 5 см³ безбелкового фильтрата. В каждую пробирку добавляют 5 см³ раствора гидроксида натрия молярной концентрацией 0, 5 моль/дм³, перемешивают, выдерживают 10 мин, добавляют 1, 5см³ реактива Фолина, разбавленного дистиллированной водой в соотношении 1: 2, смесь вновь перемешивают.

Через 30 мин измеряют оптическую плотность растворов по отношению к раствору трихлоруксуснои кислоты на фотоэлектроколориметре при X = 600 нм в кювете с расстоянием между рабочими гранями 10 мм или на спектрофотометре при той же длине волны в кювете аналогичного размера.

Содержание фенола определяют по калибровочному графику.

Построение калибровочного графика. В пробирки вносят следующие объемы стандартного раствора фенола: 0; 0, 25; 0, 5; 1, 0; 1, 5; 2, 0 см³, что соответствует массе фенола: 0; 5; 10; 20; 30; 40 мкг. Объем в каждой пробирке доводят до 2, 5см³, добавляя соответствующий объем раствора трихлоруксуснои кислоты концентрацией 50 г/дм³ (2, 5; 2, 25; 2, 0; 1, 5; 1, 0; 0, 5 см³) и перемешивая. В каждую пробирку вливают 5 см³ раствора гидроксида натрия молярной концентрацией 0, 5 моль/дм³, перемешивают, выдерживают 10 мин и добавляют 1, 5 см³ реактива Фолина, разбавленного дистиллированной водой в соотношении 1: 2. Смесь вновь перемешивают.

Через 30 мин измеряют оптическую плотность растворов по отношению к раствору трихлоруксуснои кислоты на фотоэлектроколориметре при λ = 600 нм в кювете с расстоянием между рабочими гранями 10 мм или на спектрофотометре при той же длине волны в кювете аналогичного размера.

По полученным средним данным трех стандартных растворов на миллиметровой бумаге размером 20 х 20 см строят калибровочный график, откладывая на оси абсцисс содержание фенола (мкг в 1 см³ окрашенного раствора), а на оси ординат — значение соответствующей оптической плотности D. Калибровочный график должен проходить через начало координат. Пример калибровочного графика приведен на рисунке.

Калибровочный график ДМ определения массовой доли фенола с фотоэлектроколориметра.

Массовую долю фенола (%) вычисляют по формуле:

Х = (m₁ – m₂) • 20 • 100,

m • 2, 5 • 10⁶

где m₁ и m₂ — масса фенола соответственно в опытной и контрольной пробирках, найденная по калибровочному графику, мкг; 20 — разведение, см³; m — масса анализируемой пробы, г; 2, 5 —объем фильтрата, отобранный для цветной реакции, см³; 10⁶ —коэффициент пересчета в граммы.

Вычисления проводят до четвертого десятичного знака.

Результаты экспериментальных работ по анализу эффективности тепловой обработки вареных мясных продуктов оформить в виде таблицы:

Полученные данные студенты сравнивают с нормативными показателями для каждого вида продукции, самостоятельно делают выводы и формулируют заключение.