Сайт связывания комплекса ORC

Рис. 3.5. Организация прототипной области начала репликации ARS1

S. cerevisiae.

Изогнутыми стрелками отмечены сайты инициации двунаправленной репликации хромосомной ДНК. Приведена последовательность комплементарной нити сайта ACS

Таблица 3.1

Сравнение субъединиц комплекса ORC из разных эукариотов

* - Приведены средние значения идентичности и гомологии между белками S. cerevisiae, дрозофилы и человека

Связанный с ДНК комплекс ORC защищает участок ДНК длиной около 50 п.н. Для связывания с ARS требуется координированное действие 5 из 6 субъединиц ОRС и не нужна лишь самая маленькая субъединица Orc6. Предварительные данные об архитектуре комплекса ORC на ДНК ARS получены с использованием сшивки химическими агентами и УФ-светом. Показано, что субъединицы Orc1, Orc2 и Orc4 взаимодействуют только с верхней нитью последовательности ACS в большой канавке ДНК, а субъединица Orc5 контактирует со смежным элементом В1 (рис. 00). Такая асимметрия связывания с нитями ДНК характерна и для многих других белков, участвующих в инициации репликации. Комплекс ORC может рассматриваться как белок-инициатор – аналог DnaA. Однако он занимает ОНР во время клеточного цикла постоянно, а не только в фазе S. Очевидно, что простого связывания ORC с ОНР недостаточно для инициации репликации. Комплекс ORC играет лишь роль “посадочной площадки” на ДНК, необходимой для последовательной вербовки на ДНК других компонентов аппарата инициации репликации.

Рис. 3.6. Архитектура комплекса ORC c ДНК ARS.

1-6 – субъединицы Orc1-Orc6. Двусторонними стрелками изображены взаимодействия белков Orc друг с другом и с основаниями элементов ACS и В1области начала репликации ARS