Абсорбционная спектроскопия.

1. Поглощение раствора, содержащего вещество с молекулярным весом 423 в концентрации 32 мкг/мл, составляет 0, 27 при 540 нм в односантиметровой кювете. Чему равен коэффициент молярного погашения при 540 нм? Допустить, что закон Бера соблюдается.

2. Раствор соединения А имеет D260=0, 45 и D450=0, 03. Раствор второго соединения Б имеет D260=0, 004 и D450=0, 81. 2 мл раствора А смешали с 1 мл раствора Б. Результирующая оптическая плотность смеси D260=0, 3 и D450=0, 46. Имеется ли взаимодействие между А и Б? Объяснить. Какое допущение делается, чтобы подтвердить это заключение?

3. Раствор соединения А имеет D260=0, 45 и D450=0, 03. Раствор второго соединения Б имеет D260=0, 004 и D450=0, 81. 2 мл раствора А смешали с 1 мл раствора Б. Результирующая оптическая плотность смеси D260=0, 3 и D450=0, 28. Имеется ли взаимодействие между А и Б? Объяснить. Какое допущение делается, чтобы подтвердить это заключение?

4. Предположим, что вы захотели узнать, сколько цитохрома с содержится в одной клетке Е. coli. Известен молярный коэффициент погашения в максимуме поглощения. Как вы проделаете это измерение?

5. Молярный коэффициент погашения данного соединения 348 при 482 нм. Раствор этого соединения имеет D482=1, 6. При разбавлении 1: 1, 1: 2, 1: 3, 1: 4, 1: 5 и 1: 6 величины D482 составляют 1, 52, 1, 42, 1, 05, 0, 84, 0, 70 и 0, 61 соответственно. Какова молярность исходного раствора?

6. Молярные коэффициенты погашения вещества А при 260 и 280 нм равны соответственно 5248 и 3150. Для выделения А используется реагент Б, имеющий молярные коэффициенты погашения 311 и 350 при 260 и 280 нм. После выделения А D260=2, 50 и D280=2, 00. Какова концентрация А?

7. Белок помещают в 20%-ный раствор этиленгликоля и снимают его дифференциальный спектр против раствора, не содержащего этиленгликоля. При всех длинах волн De=0. Что вы можете заключить о структуре белка?

8. Белок изучают в 20%-ном диметилсульфоксиде и 20%-ной сахарозе. В сахарозе De=0. В диметилсульфоксиде проявляется характерный дифференциальный спектр триптофана. Наблюдаемая величина De удваивается, если белок нагревают в диметилсульфоксиде до 60°С. В 20%-ной сахарозе после нагревания до 60°С величина De.эквивалентна De для 8 триптофановых остатков. Что вы можете сказать об этом белке?

9. В процессе титрования белка при 295 нм найдено, что De295 резко возрастает при рН 9, 6. При рН 11, 7 De295 возрастает снова, причем это увеличение составляет одну треть от первого. Если затем рН понизить до 6 и далее постепенно увеличивать, кривая зависимости De295 от рН почти идентична кривой белка до титрования, за исключением того, что увеличение De295 составляет только две трети от наблюдаемого вначале. Известно, что в белке имеется восемь тирозиновых остатков. Что вы можете сказать о структуре белка?