Характеристика препаратов лигнинов

Для их характеристики были выбран элементный анализ, который представлен в таблице 2 и их среднечислового и среднемассового распределения в таблице 3 где Mn-среднечисленная молекулярная масса, Mw-средневесовая молекулярная масса D-дисперсность

Таблица 2-элементный состав лигнинов

Таблица 3-характеристика молекулярных масс лигнинов

2.5 проб подготовка

На аналитических весах взвешивается 1 мг лигнина и растворяется в 100 мкл дмфа в другой эпиндорф в взвешивается 30 мг ионной жидкости (матрицы) и растворяется в 100мкл метанола далее на мишень капается 0.5 мкл ионной жидкости и раствора лигнина и высушивается методом “высушенных капель” которые представлены на рисунке 5.

Рисунок 5-высушенные капли

2.6 калибровка

Калибровка масс-спектрометра – это важнейший шаг для определения молекулярного веса иона неизвестного образца. Калибровка времяпролетных масс-спектрометров основана на использовании основного уравнения: z t ∝ m, или m/z = At2 +B Обычно для определения калибровочных постоянных. А и. В измеряются времена прилета ионов двух стандартных веществ, массы ионов которых хорошо известны. Существует два вида калибровки: внутренняя и внешняя. При внутренней калибровке один или более стандартных веществ смешиваются с неизвестным веществом. Эта смесь затем смешивается с раствором матрицы для МАЛДИ анализа. В идеале стандарты выбираются так, чтобы их массы были выше и ниже массы исследуемого вещества. Один стандарт также может использоваться для калибровки, если он дает в спектре интенсивные пики как от однократно заряженных ионов, так и от двукратно заряженных ионов. При внешней калибровке приготовление стандартов и образца проводится раздельно. Сперва регистрируется масс спектр стандартов, а затем без изменения каких- либо параметров записывается спектр неизвестного вещества. Очень важно, чтобы все параметры эксперимента, которые могут влиять на изменение времени полета ионов, оставались неизменными. Константы калибровки вычисляются из спектра стандартов и применяются к неизвестному спектру.

В нашем случае мы использовали внешнею калибровку по стандартам белков, так как спектры лигнина находятся в том же диапазоне как стандарты белков, которые представлены на рисунке 6.

Рисунок6-масс-спектр стандартов белков

3. Запись масс-спектров проб диоксанлигнина

После нанесения образца на пластину МАЛДИ, она вставляется в масс- спектрометр и система откачивается. Далее настраивался диапазон масс 700-5000. Да, затем подбирается количество выстрелов лазера за одну позицию оптимальным было выбрано 25. Далее был выбран положительный режим, т.е. отбирались положительные ионы, которые отправлялись к детектору. Оптимальным количеством выстрелов лазера экспериментально было выбрано 100 (позиций). Энергией лазера экспериментально был выбран диапазон 80-110 для разных лигнинов т.к. разная степень ионизации и летучести у образцов.