Задача №1 Исследование соскоба из цервикального канала от обследуемой с бесплодием с помощью тест-системы MуcoplasmaDUO

ФИО________________________________________ Число______________

Тема: Микробиологическая диагностика урогенитальных инфекций, вызванных микоплазмами и уреаплазмами

Задача №1 Исследование соскоба из цервикального канала от обследуемой с бесплодием с помощью тест-системы MуcoplasmaDUO

Набор Mуcoplasma DUO позволяет культивировать, идентифицировать и дифференциально титровать урогенитальные микоплазмы, а также определять чувствительность культуры к антибиотикам. Метод позволяет получить результаты в течение 24-48 ч.

Материалом для исследования являются соскобы из уретры, цервикального канала, влагалища (и др.). Так как микоплазмы прилипают к поверхности эпителиальных клеток, материал следует собирать со слизистой с помощью специальной цервикальной щеточки после чего погрузить щеточку в 2 мл транспортной среды и взбалтать, чтобы смыть все клетки в среду.

Идентификация и титрование урогенитальных микоплазм основаны на специфических метаболических свойствах каждого микроорганизма, которые гидролизуют:

- Ureaplasmaurealiticum (UU) – мочевину;

- Mycoplasma hominis (MH) – аргинин.

При этом образуется ион аммония и происходит защелачивание среды. Вследствие этого изменяется цвет (с желтого на красный) индикатора кислотности среды, что позволяет визуализировать реакцию. Таким образом, при желтой окраске содержимого лунок – микоплазмы отсутствуют, при красной окраске – микоплазмы присутствуют в пробе. Если покраснела лунка U – в пробе присутствует UU; если покраснела лунка Н – в пробе присутствует МН; если покраснели лунки U и Н – в пробе присутствуют и UU, и МН.

Т и т р о в а н и е (определение количества) основано на принципе разведения исследуемого материала в жидкой среде. Проба последовательно разводится в транспортной среде, в лунке D (разведение 10^-1) и, наконец, в лунках U> 10⁴ и Н > 10⁴ (разведение 10^-2). Таким образом, может быть определен титр микоплазм. Этот титр соответствует лунке, цвет которой изменился на красный через 24-48 ч инкубации.

Данный набор позволяет определить титры порядка 10^-3 – 10^-4 мл, которые уже считаются этиологически значимыми.

Учет результатов: первые результаты считываются через 24 ч инкубации. При наличии положительной реакции в лунке с высоким титром (10⁴), получают окончательный результат. Второй раз считывают результаты через 48 ч в следующих случаях:

- если нужно подтвердить отрицательный результат,

- определить присутствие микоплазм в низких титрах,

определить штаммы, присутствующие в высоком титре, но характеризующиеся медленным метаболизмом

Вывод: __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________