Современные подходы к определению функции фагоцитоза. Оценка фагоцитарной функции НГ. Продукция свободных радикалов кислорода. Реакция восстановления нитросинего тетразолия.

54.Иммуноферментный анализ принципы. Особенности «сендвич» твердофазного метода ИФА. Применение.

ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ, ИФА (Enzyme immunoassay) — метод выявления антигенов и антител, основанный на определении комплекса антиген-антитело за счет введения в один из компонентов реакции ферментативной метки с последующей ее детекцией с помощью соответствующего субстрата, изменяющего свою окраску.

Для определения антигенов и антител применяются твердофазный (гетерогенный) вариант иммуноферментного анализа. Использование твердой фазы позволяет упростить процесс разделения компонентов реакции за счет иммобилизации одного из компонентов на твердой фазе и удаления субстанций, не участвующих в реакции.

ИФА применяют для диагностики:

· Вирусных

· Бактериальных

· Паразитарных болезней

· Инфекций, в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, Гепатита В и др.

· Определение гормонов

· Ферментов

· Компонентов комплемента

· Цитотоксинов

· Лекарственных препаратов и других БАВ, содержащихся в исследуемом материале.

55.В чем состоит двухэтапный принцип оценки иммунного статуса. Перечислите тесты 1 и 2 уровня. Какие биологические материалы используются для оценки иммунного статуса. Двухэтапный принцип оценки иммунного статуса: на первом этапе выявляют более общие дефекты клеточного и гуморального звена адаптивного и врожденного иммунитета. Тесты 1-го уровня: используются для определения: - относительного и абсолютного числа лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови(общепринятый анализ крови), - относительного и абсолютного количества Т- и В- лимфоцитов, NK-клеток с использованием моноклональных антител, -субпопуляций Т лимфоцитов, -концентрации сывороточных иммуноглобулинов основных классов(M, G, A), -фагоцитарной активности лейкоцитов, -активности комплимента, -возможен анализ других показателей(например, цитокинов).

На втором этапе использование аналитических тестов позволяет выявить более тонкие и конкретные дефекты в иммунной системе. Комплекс тестов 2-го уровня может существенно варьировать в зависимости от поставленных врачом задач. Определяют: количество субпопуляций Т лимфоцитов, -фенотипические хар-ки кл. иммунной системы на разных этапах иммуногенеза и иммунопоэза, -экспрессию активных маркеров, -пролиферативный ответ Т и В лимфоцитов на митогены, антигены и аллогенные кл., -активность килерных лимфоцитов, -классы и подклассы иммуноглобулинов, - различные этапы фагоцитоза и рецепторного аппарата фагоцитов, содержание различных компонентов комлимента, и др.показатели.

Используют различные биологические материалы: цельную периферическую кровь, сыворотку крови, плазму крови, клеточные элементы крови, спинномозговую жидкость, выделения из носа, мочу, слезную жидкость, цитоплазматические и ядерные компоненты кл. и др.

56.Охарактеризуйте этапы аллергологического обследования.Тесты in vivo.Преимущества.Особенности проведения внутрикожных проб.Скарификационные пробы. Прик-тесты. Оценка кожных проб.Противопоказания.

1.

1.Этапы аллергологического обследования: Сбор аллергоанамнеза (анамнеза болезни и жизни пациента).

2. Объективное обследование больного.

3. Данные инструментальных методов обследования (рентген, спирометрия, эндоскопия и т. д.).

4. Данные аллергологического тестирования in vivo.

5. Данные лабораторных исследований.in vitro

6. Данные эффективности назначенной терапии.

К методам in vivo относятся :

Скарификационные пробы

Прик-тесты — способ проведения внутрикожных проб для диагностики ГНТ.

Специальную металлическую или пластиковую иглу с ограничителем погружают в раствор аллергена и прокалывают кожу на глубину 1мм.

В качестве (+)- контроля используют 10% р-р гистамина, а (-)- растворитель.

Результат учитывают через 15–20 мин измеряя диаметр папулы в двух направлениях.