Справочный материал для оформления протоколов и выполнения практической работы

Идентификация диареегенных кишечных палочек по антигенному строению

2 день исследования

Проводится агглютинация на стекле красных колоний со среды Эндо с комплексной ОКА сывороткой (антитела к 22 серогруппам диареегенных кишечных палочек), причем " О" – антитела к «О» антигену, К – к «К» антигену, А – означает название набора антител). Колонию, давшую агглютинацию, отсевают на скошенный МПА.

3 день исследования

1. Агглютинация на стекле культуры со скошенного агара:

а) с ОКА сывороткой – убеждаемся в повторяемости результата 2 дня исследования;

б) с ОКВ сывороткой, в ней антитела к 4 серогруппам:

О20: К84, О26: К56, О55: К59, О111: К58;

в) с ОКЕ сывороткой, в ней антитела к 5 серогруппам:

О124: К72, О142: К86, О143: К, О144: К, О151: К;

г) с групповыми ОК – иммуноглобулинами в пределах тех серогрупп, которые обнаружены при агглютинации в пунктах «б» и «в».

Агглютинация на стекле с гретой культурой (для разрушения К-антигена) и адсорбированными О-сыворотками (О11, О124 и др.).

Вывод о серогруппе диареегенных эшерихий

4 день исследования

Определение серовара диареегенных кишечных палочек проводится в реакции иммобилизации по характеру роста в полужидком агаре с Н - сыворотками.

Иммобилизация – рост культуры по ходу укола при наличии соответствия сыворотки и жгутикового антигена культуры, отсутствие иммобилизации – рост культуры по всему столбику (диффузно).

Окончательное заключение: из фекалий больного (обследуемого) выделена диареегенная кишечная палочка ___________ (указывается серогруппа и серовар, причем серогруппа – характеристика по О и К антигенам, серовар – по Н-антигену, например: О55: К59: Н12).

В процессе выполнения практической работы постарайтесь ответить на следующие вопросы

1. Почему для выделения возбудителя при колиинфекциии используются среды Эндо и Левина, а не Плоскирева? Если делается дополнительный посев на среду Плоскирева, то с какой целью?

2. Почему нас интересуют выросшие на среде Эндо красные колонии, какие это могут быть микробы?

3. Как решить основную задачу 2-го дня исследования: возможно ли в этих колониях присутствие диареегенных эшерихий, как это доказать?

4. В каком случае мы можем выдать отрицательный результат на 2-ой день исследования?

5. Что содержат комплексы ОКА, ОКВ, ОКС, ОКД, и ОКЕ, почему мы исследуем только 3 из них? Может ли возникнуть потребность в использовании комплексов ОКС и ОКД?

6. Подтверждает ли выделение диареегенных кишечных палочек ориентировочная агглютинация с групповым ОК-иммуноглобулином в пределах одного из комплексов (кроме ОКА). Если нет, то почему?

7. Что нужно предпринять, чтобы подтвердить выделение диареегенных эшерихий?

8. В каком случае мы можем выдать отрицательный результат на 3 день исследования?

9. Что такое реакция иммобилизации, какова техника постановки?

10. Что такое Col-фактор? Какие свойства кодирует этот фактор?

11. Как проводится определение колициночувствительности, и что такое колицинотип?

12. Установлен ли источник инфекции по заданиям 1-4?