Ход определения.

При определении аскорбиновой кислоты жидких продуктах (соки, газ. воды) в случае их непрозрачности производят центрифугирование. При необходимости (при большом содержании аскорбиновой кислоты) разбавляют 1%-раствором соляной кислоты.

Ход работы. В коническую колбочку отмеривают 5 мл анализируемого образца, 5 мл 1%-го раствора соляной кислоты. Содержимое каждой колбочки перемешивают и титруют ~ 0, 001 н раствором 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия до появления розовой окраски, не исчезающей в течение 30 секунд.

Приготовление вытяжек.

Навеску исследуемого материала в 5-10 г заливают в ступке 20 мл 1-процентной

соляной кислоты и быстро растирают в присутствии кислоты до образования гомогенной массы. Процесс растирания не должен длиться больше 10 минут. Полученную массу сливают из ступки (через стеклянную палочку и воронку) в мерную колбу на 100 мл. Ступку споласкивают несколько раз 1-процентной соляной кислотой, которую выливают в ту же мерную колбу. Содержимое колбы доводят до метки, колбу закрывают пробкой, сильно встряхивают и оставляют стоять около 5 минут. Затем содержимое колбы центрифугируют и определяют содержание аскорбиновой кислоты титрованием.

Расчет количества витамина С в пищевых продуктах проводят по формуле:

Т ´ А ´ 50 ´ 100

Х = ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾,

Б ´ В

где Х – содержание аскорбиновой кислоты в мг% (количество мг аскорбиновой кислоты в 100 г анализируемого продукта);

Т – количество аскорбиновой кислоты (в мг), эквивалентное приготовленному раствору 1 мл ~0, 001 н раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия (молекулярная масса аскорбиновой кислоты равна 176, а грамм-эквивалент – 88 г., т.к. фактор эквивалентности в реакции 1/2);

А – количество ~0, 001 н раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия, пошедшее на титрование (средняя арифметическая трех проб в мл);

50 – общее количество вытяжки в мерной колбочке (в мл);

100 – пересчет на 100 г исследуемого материала;

Б – количество фильтрата, взятое для титрования (в мл);

В – количество исследуемого материала, взятое для анализа (в г);

Сравните полученные результаты с литературными данными.

Аскорбиновая кислота не синтезируется в организме человека. Главным источником этого витамина являются свежие овощи и фрукты. В различных пищевых продуктах содержится следующее количество витамина С (в мг%):

Черная смородина – 100-400 Укроп – 120-135 Лимон – 40-55 Капуста (свежая и квашенная) – 30-40 Томаты – 20-40 Лук зеленый – 16-33 Яблоки северные – 20-40 Яблоки южные – 5-17 Смородина красная – 5-15 Картофель – 7-10 Бананы – 7-10 Печень – 20-50 Селезенка – 20-50 Кумыс – 20-25 Хвоя ели и сосны, 150-250.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ МЕТОДОМ ТИТРА Принцип метода количественного определения витамина С осно- ван на его способности восстанавливать 2, 6-дихлорфенолиндофенол, который в щелочной среде имеет синюю окраску, а в восстановлен- ном состоянии бесцветный [1]. Количественное определение витамина С проводят, титруя иссле- дуемый раствор, подкисленный соляной кислотой, щелочным раство- ром 2, 6-дихлорфенолиндофенола. Пока в титруемом растворе содер- жится витамин С, приливаемый щелочной раствор 2, 6-дихлорфено- линдофенола будет обесцвечиваться за счет образования восстанов- ленной формы аскорбиновой кислоты. Как только все количество ви- тамина С, имеющееся в исследуемом растворе, окислится, 2, 6-ди- хлорфенолиндофенол не будет восстанавливаться и титруемый рас- твор приобретет розовую окраску за счет перехода щелочного рас- твора 2, 6-дихлорфенолиндофенола синего цвета в 2, 6-дихлорфено- линдофенол красного цвета в кислой среде. Зная количество 2, 6-дихлорфенолиндофенола, израсходованное на титрование, и его титр, установленный по аскорбиновой кислоте, вы- числяют содержание аскорбиновой кислоты в исследуемом растворе. Оборудование и реактивы. Соляная кислота, 2 %-ный раствор. Аскорбиновая кислота, кристаллическая. Серная кислота, 2 %-ный раствор. KJ, кристаллический. Крахмал, 1 %-ный раствор. KJO3, точно 0, 001 н. раствор (0, 03568 г KJO3 растворяют в воде и доводят до 1 л). 2, 6-дихлорфенолиндофенол, 0, 001 н. раствор. Для приготовления этого раствора применяют буферную фосфатную смесь (1/15 М), при- готовленную по Серенсену, так как индикатор в водном растворе до- вольно быстро разрушается. Для этого берут водяные растворы КН2РО4 – 9, 078 г в 1 л и Nа2НРО4⋅ 2Н2О – 11, 867 г в 1 л. Растворы хра- нят отдельно. Затем их смешивают в соотношении 2: 3, тогда рН = 6, 9 … 7, 0. Отвешивают 0, 25 г красителя, приливают 700 мл дис- тиллированной воды, взбалтывают и добавляют 300 мл буферной смеси. На следующий день раствор отфильтровывают и тщательно перемешивают. Определяют титр приготовленного раствора. Ход анализа. Точную навеску исследуемого материала (сухих ягод шиповника – 1 г, хвои – 1 г, капусты – 5 г, картофеля – 5 г) тща- тельно растирают в фарфоровой ступке с 4 мл 2 %-ной соляной ки- слоты, добавив немного измельченного стекла. Затем без потерь пе реносят содержимое ступки в мерную колбу на 25 мл, несколько раз смывая ступку водой и сливая ее по стеклянной палочке в ту же колбу, и доводят объем раствора дистиллированной водой до метки. Полученную смесь оставляют на 5 – 10 мин. Содержимое колбы тща- тельно перемешивают, фильтруют через бумажный фильтр и фильт- рат используют для определения витамина С. Экстракт, полученный из картофеля, не фильтруют. Для титрования отмеривают в коническую колбочку определен- ный объем фильтрата (шиповника – 1 мл, хвои – 5 мл, капусты – 5 мл, картофеля – всю полученную смесь без фильтрации), добавляют 4 мл 2 %-ного раствора соляной кислоты и титруют из бюретки 0, 001н. раствором 2, 6-дихлорфенолиндофенола до появления розового окра- шивания, не исчезающего около 30 с. В контрольной пробе вместо вытяжки берется соответствующий объем смеси: 4 мл 2 %-ной соля- ной кислоты и 21 мл воды. Определение титра раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенола В мерной колбе на 50 мл растворяют несколько кристалликов (1 – 1, 5 мг) аскорбиновой кислоты в 2 %-ной серной кислоте и до- водят этой же кислотой до метки, тщательно перемешивают. В две конические колбочки берут по 5 мл приготовленного раствора ас- корбиновой кислоты и после добавления кристалликов KJ (около 5 – 10 мг) и 5 капель 1 %-ного раствора крахмала титруют одну кол- бочку 2, 6-дихлорфенолиндофенолом, другую – точно 0, 001 н. рас- твором KJO3 (0, 03568 г KJO3 растворяют в воде и доводят до 1 л). Расчет титра раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенола по аскорбино- вой кислоте ведут по формуле: б a T ⋅ = 0, 088, где Т – количество мг аскорбиновой кислоты, соответствующее 1 мл раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенола; 0, 088 – количество мг аскорбиновой кислоты, соответствующее 1 мл 0, 001 н. раствора йодата калия; а – количество мл 0, 001 н. раствора йодата калия, израсходован- ного на титрование раствора аскорбиновой кислоты; б – количество мл раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенола, израсходованное на титрование.